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过表达环状RNA泛素连接酶E3(circHERC4/hsa_circ_0007113)抑制细胞衰老的研究
文献摘要:
目的 研究泛素连接酶E3的环状RNA(cir-cHERC4/hsa_circ_0007113)与人胚肺成纤维细胞(IMR-90)的衰老的关系.方法 从circBase数据库上获得环状RNA circHERC4的全基因序列,将其克隆到环状RNA表达载体pLC5-ciR中,体外构建重组体pLC5-ciR(+)hsa_circ_0007113,经PCR、酶切、测序等对重组质粒进行鉴定.利用脂质体2000转染试剂将重组质粒转染到HEK293T和IMR90细胞中,并利用RT-PCR检测正常细胞组、空载体组及重组载体组中环状RNA circHERC4的表达情况;SA-β-gal染色检测各组细胞衰老情况;CCK-8法检测各组细胞增殖情况.结果 测序正确,成功构建了环状RNA circHERC4的过表达载体,circHERC4可在HEK293T细胞中高效表达.与对照组相比,重组载体组的SA-β-gal染色阳性率降低(P<0.05),细胞增殖率升高(P<0.05).过表达circHERC4后能提高IMR90细胞的增殖,抑制细胞的衰老.结论 cir-cHERC4具有潜在的抗衰老作用,为深入研究circHERC4的功能奠定了基础.
文献关键词:
环状RNA;衰老;泛素连接酶4环状RNA(cir-cHERC4 hsa_circ_0007113);人胚肺成纤维细胞(IMR-90)
中图分类号:
作者姓名:
李华玲;杨迪;韦俊杰;陈章悦;陈菊萍
作者机构:
扬州大学医学院生化教研室,扬州 225001;扬州大学附属第一人民医院皮肤科,扬州 225001
文献出处:
引用格式:
[1]李华玲;杨迪;韦俊杰;陈章悦;陈菊萍-.过表达环状RNA泛素连接酶E3(circHERC4/hsa_circ_0007113)抑制细胞衰老的研究)[J].安徽医科大学学报,2022(07):1100-1105
A类:
circHERC4,cHERC4,circBase,pLC5,IMR90
B类:
泛素连接酶,E3,hsa,细胞衰老,人胚肺成纤维细胞,全基因序列,ciR,体外构建,重组体,重组质粒,脂质体,质粒转染,HEK293T,空载,重组载体,中环,SA,gal,CCK,过表达载体,高效表达,细胞增殖率,细胞的增殖,抗衰老作用
AB值:
0.18795
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