目的 研究熊果酸通过外泌体介导微小核糖核酸-155-5p(micro ribonucleic acid-155-5p,miR-155-5p)对脓毒症大鼠心肌的保护作用.方法 从60只SD雄鼠中随机挑出50只为建模大鼠,通过腹腔注射内毒素(lipopolysaccharide,LPS)法建立脓毒症大鼠模型.余下10只为正常对照组.将建模成功大鼠随机分为5组,熊果酸高、中、低剂量组、GW4869组、模型组.熊果酸高、中、低剂量组腹腔注射5 mg/kg LPS+50％二甲基亚砜(dimethylsurfoxide,DMSO)后立即尾静脉注射熊果酸120、80、40 mg/kg+50％DMSO混合液;GW4869组腹腔注射5 mg/kg LPS+50％DMSO后立即尾静脉注射鞘磷脂酶抑制剂GW48692.5μg/g+50％DMSO混合液;模型组大鼠腹腔注射5 mg/kg LPS+50％DMSO后,尾静脉注射等体积生理盐水;正常对照组仅腹腔注射等体积生理盐水后,尾静脉注射等体积生理盐水.另将各组外泌体与原代培养乳鼠心肌细胞共培养,设置未加外泌体仅加入等体积PBS的心肌细胞为PBS对照组;通过脂质体转染技术将miR-155-5p minic转染至大鼠心肌细胞,将转染miR-155-5p心肌细胞与动物实验中各组外泌体共培养24 h,另设置未转染miR-155-5p minic且不加外泌体仅加入等体积PBS的心肌细胞为PBS对照组,仅转染miR-155-5p minic且不加外泌体的心肌细胞为miRNA-155-5p minic转染组和GW4869+熊果酸+miR-155-5p minic组(其中熊果酸分别设置低、中、高剂量).结果 模型组和GW4869组大鼠心肌细胞出现明显空泡样变、核肿胀,组织水肿明显,可见明显炎性浸润,熊果酸3剂量组大鼠心肌组织病变均出现好转;各组均从外周血中分离出外泌体;模型组和熊果酸3剂量组外泌体中miR155-5p表达水平均高于正常对照组(P<0.05),GW4869组外泌体中miR155-5p表达水平低于正常对照组(P<0.05);经培养鉴定证实所取细胞为乳鼠心肌细胞;模型组、GW4869组、熊果酸3剂量组白介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、白介素6(interleukin-6,IL-6)水平均高于磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline,PBS)对照组和正常对照组(P<0.05),熊果酸3剂量组上述指标水平均低于模型组和GW4869组(P<0.05);miR-155-5p minic转染乳鼠心肌细胞后miR-155-5p minic转染组细胞中miR-155-5p表达水平升高(P<0.05).将各组外泌体与miR-155-5p minic转染后细胞共孵育,GW4869组细胞培养基中IL-1β、IL-6浓度均高于其余各组(P<0.05),模型组+miR-155-5p minic均高于miR-155-5p minic转染组(P<0.05),GW4869+熊果酸高剂量+miR-155-5p minic组与miR-155-5p minic转染组差异均无统计学意义(P>0.05).结论 熊果酸可改善脓毒症大鼠心肌病变,且可通过抑制外泌体中miR-155-5p表达水平,抑制心肌细胞炎症反应.

熊果酸;外泌体;miR-155-5p;脓毒症;心肌细胞

刘雯;李国荣;侯晨辉;李江

郑州铁路职业技术学院护理学院 郑州 451460;河南省天然药物提取和医疗技术应用工程研究中心 郑州 451460

世界科学技术-中医药现代化

[1]刘雯;李国荣;侯晨辉;李江-.熊果酸调控外泌体介导的miR-155-5p保护脓毒症大鼠心肌组织的作用研究)[J].世界科学技术-中医药现代化,2022(10):4047-4054

dimethylsurfoxide,kg+50,GW48692,g+50,GW4869+

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