目的 观察解毒通络生津方对干燥综合征(SS)模型NOD小鼠PD-1/PD-L1通路的影响,探讨其作用机制.方法 将24只8周龄雌性NOD小鼠随机分为3组,即模型组(Model)、解毒通络生津方组(TCM)、解毒通络生津方加抗PD-L1单抗阻断组(TCM+ɑ-PD-L1),每组8只.另选8只8周龄雌性ICR小鼠作为正常对照组(Ctrl).12周龄时开始中药干预,TCM组按照每天24.4 g·kg-1解毒通络生津方灌胃,TCM+ɑ-PD-L1组在每天给予24.4 g·kg-1解毒通络生津方灌胃的基础上,腹腔注射抗PD-L1抗体,1周2次,每次100 μg,Ctrl组和Model组给予同等剂量的生理盐水灌胃,实验期间记录各组小鼠第9、12、16、20周龄时的日均饮水量,干预8周后,小鼠统一麻醉下摘取颌下腺.HE染色观察各组小鼠颌下腺中炎症细胞浸润情况;流式细胞仪检测小鼠颌下腺CD4+CD25+Foxp3+PD-1+Treg细胞的表达;Western Blot检测小鼠颌下腺中PD-1、PD-L1和Foxp3蛋白的表达.结果 随着小鼠周龄的增长,Ctrl组小鼠日均饮水量基本不变,Model组小鼠的日均饮水量有明显上升趋势,TCM组小鼠日均饮水量下降,TCM+α-PD-L1组小鼠日均饮水量上升;与Model组比较,TCM组炎症细胞浸润灶明显减少(P＜0.001);与TCM组比较,TCM+ɑ-PD-L1组炎症细胞浸润增多(P＜0.001);与 Ctrl 组比较,Model 组 CD4+CD25+Foxp3+PD-1+Treg 的表达降低(P＜0.001),与 Model 组比较,TCM 组 CD4+CD25+Foxp3+PD-1+Treg 表达升高(P＜0.01);与 TCM 组比较,TCM+ot-PD-L1 组CD4+CD25+Foxp3+PD-1+Treg 的表达降低(P＜0.01);与 Ctrl 组 比较,Model 组小鼠颌 下腺中 PD-1、PD-L1 和Foxp3蛋白的表达降低(P＜0.01);与Model组比较,TCM组小鼠颌下腺中PD-1、PD-L1和Foxp3蛋白的表达升高(P＜0.01);与TCM组比较,TCM+α-PD-L1组小鼠颌下腺中PD-1、PD-L1和Foxp3蛋白的表达降低(P＜0.001).结论 解毒通络生津方可能通过PD-1/PD-L1信号通路促进SS模型小鼠Treg细胞活化,上调Foxp3的表达,增强Treg细胞抑制免疫炎症的作用,PD-1/PD-L1可能是解毒通络生津方治疗SS的一个作用靶点.

解毒通络生津方;干燥综合征;PD-1/PD-L1;Treg细胞;Foxp3;NOD小鼠

程丹丹;李永明;薛鸾

上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院 上海 200437

世界科学技术-中医药现代化

[1]程丹丹;李永明;薛鸾-.解毒通络生津方对干燥综合征NOD小鼠PD-1/PD-L1信号通路的影响)[J].世界科学技术-中医药现代化,2022(09):3580-3588

解毒通络生津方,生津方,TCM+,CD4+CD25+Foxp3+PD,1+Treg,TCM+ot

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