目的 基于网络药理学和分子对接的方法探讨龙眼叶治疗2型糖尿病(T2DM)的作用机制,并通过体外实验进行初步验证.方法 采用中药系统药理学分析平台(TCMSP)并结合化源网数据库和相关药理活性文献筛选出龙眼叶的活性成分;通过Swiss TargetPrediction网站在线分析筛选活性成分的靶点.利用OMIM、GeneCards、DrugBank三个数据库获取T2DM的相关靶点,进而利用韦恩(VENNY)2.1筛选出活性成分与T2DM的交集靶点;然后将其导入STRING数据库以进行蛋白质互作网络(PPI)网络构建;采用Cytoscape v3.8.0软件构建"中药-化学成分-关键靶基因-疾病"网络图;通过DAVID数据库对交集靶点进行GO注释和KEGG通路富集分析,GraphPad Prism 8.3软件将其可视化;运用SYBYL-X 2.0和Discovery Studio 4.5软件对龙眼叶排名靠前的活性成分和关键靶点进行分子对接,验证其生物活性.验证实验以人肝癌细胞(HepG2)作为研究对象,高糖诱导胰岛素抵抗HepG2细胞模型,CCK8法检测细胞增殖抑制率,蛋白印迹(Western blot)检测磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K-AKT)信号通路相关蛋白的表达情况.结果 共筛选出龙眼叶有16个活性成分,活性成分和疾病的交集靶点共96个,网络拓扑分析筛选出关键靶点16个.生物学过程包括凋亡过程的负调控、细胞质膜、酶结合等.龙眼叶在改善T2DM主要作用于HIF-1信号通路、胰岛素抵抗信号通路、PI3K-AKT信号通路等.分子对接显示山柰酚和EGFR、槲皮素和PTGS2、木犀草素和PIK3R1有比较强的结合活性.细胞实验结果表明龙眼叶提取物可以上调IR模型HepG2细胞AKT-1、p-AKT-1、p-PI3Kp85蛋白表达.结论 龙眼叶抗T2DM的作用机制可能与PI3K-AKT、HIF-1、胰岛素抵抗等信号通路有关.

龙眼叶;2型糖尿病;网络药理学;分子对接;PI3K-AKT信号通路

韦金玉;胡珏;梁洁;陈奎奎;黄冬芳;陈辉华;祁金丽;赵立春

广西中医药大学药学院 南宁 530200;广西壮瑶药工程技术研究中心 南宁 530200;优势中成药与民族药开发工程技术研究中心 南宁 530200;广西高校中药提取纯化与质量分析重点实验室 南宁 530200

世界科学技术-中医药现代化

[1]韦金玉;胡珏;梁洁;陈奎奎;黄冬芳;陈辉华;祁金丽;赵立春-.龙眼叶治疗2型糖尿病的网络药理学研究及实验验证)[J].世界科学技术-中医药现代化,2022(02):569-581

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