目的 观察结肠癌HCT116细胞健脾消癌方的条件培养液对HUVEC细胞管腔形成的影响,从PI3K/Akt生物轴调控角度探讨其作用机制.方法 培养HCT116细胞,细胞设3组:对照组,健脾消癌方组(加入15％健脾消癌方含药血清)及人参皂苷Rg3组;制备HCT116细胞健脾消癌方条件培养液(分组及制备方法见实验方法),用条件培养液干预HUVEC(脐静脉内皮细胞,Human Umbilical Vein Endothelial Cells),Matrigel基质胶法检测HCT116细胞健脾消癌方条件培养液对HUVEC小管形成的影响.随后采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组HCT116细胞磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、p-Akt、VEGF(血管内皮生长因子,Vascular endothelial growth factor)蛋白表达.最后在结肠癌HCT116荷瘤小鼠中验证健脾消癌方对肿瘤生长速度的影响,并经瘤组织VEGF蛋白表达、CD31免疫组化染色检测肿瘤内血管生成情况.结果 模型组HUVEC细胞管腔形成较空白血清组显著增加(P＜0.05);健脾消癌方组及人参皂苷Rg3组较模型组HUVEC细胞管腔形成显著减少(P＜0.01).p-Akt和VEGF蛋白表达水平模型组高于空白血清组(P＜0.05),健脾消癌方组及人参皂苷Rg3组显著低于模型组(P＜0.01);PI3K、Akt蛋白表达量组间差异无统计学意义.与对照组比较,模型组荷瘤小鼠肿瘤体积显著性增大,瘤组织内VEGF表达、CD31阳性面积显著性增加,差异有统计学意义(P＜0.05);与模型组比较,健脾消癌方组及人参皂苷Rg3组荷瘤小鼠肿瘤体积显著减小,瘤组织内VEGF表达、CD31阳性面积降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 健脾消癌方可抑制肿瘤的血管生成和生长,其作用机制可能与PI3K/Akt生物轴调控VEGF表达有关.

结直肠癌;健脾消癌方;PI3K/Akt信号通路;血管内皮生长因子;血管生成

王容容;王其美;田雪飞;柏正平;蒋益兰

湖南省中医药研究院 长沙 410006;湖南中医药大学中西医结合学院 长沙 410028

世界科学技术-中医药现代化

[1]王容容;王其美;田雪飞;柏正平;蒋益兰-.健脾消癌方通过PI3K/Akt信号通路抑制结肠癌血管生成的研究)[J].世界科学技术-中医药现代化,2022(02):502-512

健脾消癌方,PI3K,Akt,结肠癌,血管生成,HCT116,条件培养液,HUVEC,管腔形成,含药血清,人参皂苷,Rg3,制备方法,实验方法,脐静脉内皮细胞,Human,Umbilical,Vein,Endothelial,Cells,Matrigel,基质胶,蛋白免疫印迹法,blot,磷脂酰肌醇,蛋白激酶,VEGF,血管内皮生长因子,Vascular,endothelial,growth,荷瘤小鼠,肿瘤生长,生长速度,CD31,免疫组化染色,肿瘤内,白血,蛋白表达水平,肿瘤体积,可抑制,结直肠癌

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