目的 探讨干扰有丝分裂阻滞缺陷2样蛋白1(MAD2L1)基因表达对乳腺癌(BC)细胞凋亡的影响及其机制.方法 采用qRT-PCR检测正常乳腺上皮细胞系MCF-10A和4种BC细胞系(MDA-MB-231、MCF-7、SK-BR-3和BT-20)中MAD2L1 mRNA表达水平.将MAD2L1 siRNA转染至MDA-MB-231细胞中,qRT-PCR和Western blotting检测细胞中MAD2L1 mRNA和蛋白表达水平;MTT检测细胞增殖能力;流式细胞术法检测细胞凋亡率;Western blotting检测细胞中Bax、Bcl-2、cleaved-caspase-3、p-p38MAPK(Thr180/Thr182)和p38MAPK等蛋白表达水平.采用p38MAPK抑制剂SB203580联合处理上述细胞,Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡率的变化;West-ern blotting检测Bax、Bcl-2、cleaved-caspase-3、p-p38MAPK和p38MAPK表达水平的变化.结果 BC细胞系中MAD2L1 mRNA表达水平高于MCF-10A细胞,其中MDA-MB-231细胞最为显著.干扰MAD2L1基因可降低MDA-MB-231细胞中MAD2L1 mRNA和蛋白表达水平(tmRNA=10.51,PmRNA<0.001;t蛋白=18.30,P蛋白<0.001),同时抑制细胞增殖(F组别=243.36、F时间=44.00、F组别×时间=9.881,P均<0.001),促进细胞凋亡(t=9.10,P<0.001),并上调Bax、cleaved-caspase-3和p-p38MAPK蛋白表达水平(tBax=15.05,PBax<0.001;tcleaved-caspase-3=5.26,Pcleaved-caspase-3=0.006;tp-p38MAPK=28.46,Pp-p38MAPK<0.001),下调Bcl-2蛋白表达水平(tBcl-2=14.23,P<0.001).然而,SB203580处理可抑制MAD2L1基因干扰对MDA-MB-231细胞凋亡的诱导作用(P=0.002).结论 干扰MAD2L1基因表达可抑制MDA-MB-231细胞增殖,并诱导其凋亡,其作用机制可能与激活p38MAPK信号通路有关.

乳腺癌;有丝分裂阻滞缺陷2样蛋白1;细胞凋亡;p38MAPK信号通路

封海岗;刘国文;曹洪

南华大学衡阳医学院附属第二医院乳甲外科,湖南 衡阳421001;深圳市第二人民医院甲乳外科,广东 深圳518025

山东大学学报（医学版）

[1]封海岗;刘国文;曹洪-.干扰MAD2 L1基因表达对乳腺癌细胞凋亡的影响及机制)[J].山东大学学报（医学版）,2022(10):9-16

MAD2,Thr182,tmRNA,PmRNA,tBax,PBax,tcleaved,Pcleaved,tBcl

乳腺癌细胞,有丝分裂,MAD2L1,BC,qRT,正常乳腺上皮细胞,细胞系,MCF,10A,MB,SK,BR,BT,siRNA,转染,blotting,蛋白表达水平,MTT,细胞增殖能力,流式细胞术,细胞凋亡率,caspase,p38MAPK,Thr180,SB203580,联合处理,Annexin,FITC,抑制细胞增殖,组别,tp,Pp,可抑制,基因干扰,诱导作用

0.205592