典型文献
硫酸解交联-考马斯亮蓝法测定医用交联透明质酸钠凝胶中蛋白质的含量
文献摘要:
医用交联透明质酸钠凝胶难溶于水,不能直接用福林酚法和考马斯亮蓝法等现行标准中的方法测定其中蛋白质含量,鉴于此,用硫酸溶液将医用交联透明质酸钠凝胶解交联后,比较了两种方法的检测效果.结果显示,交联透明质酸钠的降解产物(D-葡萄糖醛酸、N-乙酰基-D-葡萄糖酰胺),交联剂1,4-丁二醇二环氧甘油醚的水解产物和添加剂盐酸利多卡因等会严重影响福林酚法的测定结果,因此选择了考马斯亮蓝法.取医用交联透明质酸钠凝胶约0.5 g,按样品和解交联剂质量体积比2:1(g:mL)加入0.5 mol·L-1硫酸溶液0.25 mL,密封后在沸水浴中加热10 min.加入与上述硫酸溶液等体积的1 mol·L-1氢氧化钠溶液,混匀后加入0.10 g·L-1考马斯亮蓝G-250溶液5.0 mL,放置10 min.以空白牛血清白蛋白标准溶液为参比,用紫外-可见分光光度计测量上述体系在595 nm处的吸光度,用牛血清白蛋白标准溶液系列制作标准曲线.结果显示,牛血清白蛋白的质量浓度在2.04~10.22 mg·L-1内与其对应的吸光度呈线性关系,检出限(3.3s/k)为1.353 mg·L-1.以阴性医用交联透明质酸钠凝胶为基质进行3个浓度水平的加标回收试验,回收率为99.3%~100%,测定值的相对标准偏差(n=6)为1.3%~3.5%.
文献关键词:
解交联;考马斯亮蓝法;蛋白质;医用交联透明质酸钠凝胶
中图分类号:
作者姓名:
郭利娟;刘爱娟;孙兴霞
作者机构:
山东省医疗器械和药品包装检验研究院,济南 250101;国家药品监督管理局生物材料器械安全性评价重点实验室,济南 250101;山东省医疗器械生物学评价重点实验室,济南 250101
文献出处:
引用格式:
[1]郭利娟;刘爱娟;孙兴霞-.硫酸解交联-考马斯亮蓝法测定医用交联透明质酸钠凝胶中蛋白质的含量)[J].理化检验-化学分册,2022(02):148-151
A类:
医用交联透明质酸钠凝胶
B类:
酸解,解交联,考马斯亮蓝法,溶于,福林酚法,现行标准,蛋白质含量,硫酸溶液,检测效果,降解产物,葡萄糖醛酸,乙酰基,交联剂,丁二醇,二环,甘油醚,水解产物,盐酸利多卡因,测定结果,体积比,沸水,水浴,氢氧化钠溶液,混匀,牛血清白蛋白,标准溶液,参比,分光光度计,计测,吸光度,标准曲线,检出限,3s,浓度水平,加标回收,回收试验,测定值,相对标准偏差
AB值:
0.169519
相似文献
机标中图分类号,由域田数据科技根据网络公开资料自动分析生成,仅供学习研究参考。