目的:由于缺乏早期诊断和有效治疗,肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者预后较差.因此迫切需要更好地了解HCC相关的分子机制,并确定早期诊断和治疗的有效靶点.本研究旨在探讨神经酰胺合成酶3(ceramide synthase 3,CerS3)在HCC中的表达及其生物学作用.方法:收集深圳市人民医院159例HCC接受根治性切除术患者的临床标本,包括HCC组织和邻近非肿瘤组织.采用免疫组织化学染色、蛋白印迹法和real-time PCR检测CerS3在HCC组织和邻近非肿瘤组织中的表达.体外实验中,将Hep3B细胞分为载体对照组和CerS3载体组,并分别用含有cDNA对照或CerS3 cDNA的反转录病毒载体转染细胞;将HCC LM3细胞分为shRNA对照组或CerS3 shRNA组,并分别用含有shRNA对照或CerS3 shRNA慢病毒载体转染细胞.分别采用MTT、EdU、Transwell和划痕试验测定细胞的增殖、迁移和侵袭,并进行RNA测序以确定CerS3的下游信号.结果:与相应的相邻非肿瘤组织相比,HCC组织中CerS3 mRNA和蛋白质水平均升高(均P<0.05).Cox回归生存模型的单变量和多变量分析显示:静脉浸润(95％CI:1.8～9.2,P<0.01)、TNM分期(95％CI:2.3～5.2,P<0.05)、组织学分级差(95％CI:1.4～6.8,P<0.05)和CerS3(95％CI:1.5～3.9,P<0.05)与HCC患者总生存率显著相关.此外,与肿瘤组织中CerS3低表达患者相比,CerS3高表达患者的总生存率显著缩短(P<0.05).与载体对照组相比,CerS3载体组Hep3B细胞活力、EdU阳性细胞数、迁移和侵袭细胞数均显著增加(均P<0.05).与shRNA对照组相比,CerS3 shRNA组HCC LM3细胞活力、EdU阳性细胞数、迁移和侵袭细胞数均显著降低(均P<0.05).RNA测序将母体抗生物皮肤生长因子同源物6(small mothers against decapentaplegic family member 6,SMAD6)基因鉴定为促进HCC转移的致癌基因.结论:CerS3的过度表达与不良临床特征和不良预后密切相关.CerS3在功能上可通过激活SMAD6基因参与肝癌细胞的增殖、侵袭和转移.

神经酰胺合成酶3;母体抗生物皮肤生长因子同源物6;肝细胞癌;侵袭;转移

蔡进中;刘育齐;李启洋;文振超;李勇;陈现现

深圳市人民医院介入科,深圳518020

中南大学学报（医学版）

[1]蔡进中;刘育齐;李启洋;文振超;李勇;陈现现-.神经酰胺合成酶3通过SMAD6基因影响肝细胞癌的侵袭和转移)[J].中南大学学报（医学版）,2022(05):588-599

SMAD6,CerS3

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