典型文献
肽配基仿生亲和介质的制备和抗体纯化性能研究
文献摘要：
寻找选择性高、稳定性强、价格低廉的蛋白A替代配基是抗体分离纯化领域的研究热点.针对L型氨基酸组成的线性多肽配基易被酶降解的问题,以D型非天然氨基酸为原料合成了配基D-FYWHCLDE,通过将游离的多肽配基与α-糜蛋白酶共同孵育研究了多肽配基的酶稳定性.通过将多肽配基偶联到Sepharose 6FF基质上制备了用以分离纯化抗体的多肽亲和介质,以细胞培养上清液和人血清为实际分离体系,考察了仿生多肽亲和介质的分离效果,通过测定多次从人血清中纯化hIgG及用0.1 mol/L NaOH长时间原位清洗后多肽亲和介质的动态吸附容量(DBC)变化来考察多肽亲和介质的可重复利用性和稳定性.结果表明,与酶共同孵育8 h后,D型多肽配基的降解率(8％)远低于L型多肽配基(55％),说明D型多肽配基具有更高的酶稳定性.使用D型多肽亲和介质从细胞培养上清液中纯化的单克隆抗体(mAb)的纯度高达98％,从人血清中纯化hIgG纯度为91.37％,说明多肽亲和介质具有从复杂的实际体系中分离抗体的能力,但不具备分离抗体不同亚型的能力.经0.1 mol/L NaOH原位清洗12 h后,两种多肽亲和介质对抗体的吸附量下降均小于8％,以人血清为原料,经过40次上样后,L型多肽亲和介质DBC下降14.51％,而D型多肽亲和介质仅下降5.92％,表明D型多肽亲和介质具有更高的操作稳定性.
文献关键词：
抗体;纯化;多肽亲和介质
中图分类号：
作者姓名：
史清洪;贾立霞
作者机构：
天津大学化工学院,天津 300350
文献出处：
引用格式：
[1]史清洪;贾立霞-.肽配基仿生亲和介质的制备和抗体纯化性能研究)[J].天津大学学报（自然科学与工程技术版）,2022(11):1159-1165
A类：
FYWHCLDE,6FF,多肽亲和介质,hIgG
B类：
配基,仿生,价格低廉,分离纯化,氨基酸组成,酶降解,非天然氨基酸,糜蛋白酶,孵育,酶稳定性,偶联,Sepharose,细胞培养,养上,上清液,人血清,分离体系,分离效果,NaOH,原位清洗,洗后,动态吸附,吸附容量,DBC,可重复利用性,降解率,单克隆抗体,mAb,不同亚型,吸附量,操作稳定性
AB值：
0.219267
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