目的 探讨环指和色氨酸-天冬氨酸重复序列结构域2(RFWD2)差异表达对小鼠大脑皮层神经元树突发育及树突棘形成的功能效应.方法 利用免疫荧光鉴定RFWD2在小鼠全脑的定位及表达谱,通过RFWD2与神经元突触蛋白的共定位,明确其在神经元的细胞定位.通过电转染RFWD2-Myc过表达与shRNA载体,分析其对体外培养小鼠大脑皮层神经元树突发育、树突棘形成与突触功能的影响及作用机制.结果 RFWD2在小鼠大脑皮层与海马区均高表达,与突触形成具有明显的正相关性.RFWD2在神经元的突触前膜及后膜均有表达,与神经元树突的长度、分支数量与复杂性呈正相关.与对照组相比,RFWD2过表达显著降低了神经元突触蛋白数量[突触小泡蛋白(SYN)4.5±1.2 vs 17.2±2.4/10μm,P<0.01;突触后致密蛋白(PSD95):2.1±0.3 vs 8.5±1.3/10μm,P<0.01];而RFWD2抑制表达显著增加了突触蛋白数量(SYN:19.6±2.6/10μm,P<0.05;PSD95:11.5±1.1/10μm,P<0.05).与对照组和RFWD2过表达相比,RFWD2抑制表达降低了树突棘的数量(4.3±0.2 vs 6.2±0.5/10μm,P<0.05;4.3±0.2 vs 6.9±1.1/10μm,P<0.01).结论 RFWD2可通过Pea3家族成员与c-Jun的泛素化影响突触蛋白的表达,调控小鼠大脑皮层神经元树突发育、树突棘形成与突触功能效应,为后期作为靶点开展神经系统疾病的治疗奠定基础.

RFWD2;神经元;树突棘;突触

孙婷婷;王圆圆;方祝玲;徐佳佳;马世玟;常久翔;刘高峰;郭俣;刘长青

蚌埠医学院生命科学学院,安徽 蚌埠 233000;蚌埠医学院检验医学院,安徽 蚌埠 233000;蚌埠医学院临床医学院,安徽 蚌埠 233000

南方医科大学学报

[1]孙婷婷;王圆圆;方祝玲;徐佳佳;马世玟;常久翔;刘高峰;郭俣;刘长青-.RFWD2调控小鼠大脑皮层神经元树突发育及树突棘形成的功能效应)[J].南方医科大学学报,2022(01):78-85

RFWD2,Pea3

大脑皮层,树突棘,功能效应,色氨酸,天冬氨酸,重复序列,序列结构,结构域,差异表达,免疫荧光,全脑,表达谱,突触蛋白,共定位,细胞定位,电转染,Myc,过表达,shRNA,体外培养,突触功能,影响及作用,海马区,突触形成,分支数量,SYN,PSD95,制表,Jun,泛素化,神经系统疾病

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