典型文献
基于假病毒技术探讨黄芩苷抗HIV-1活性研究
文献摘要：
目的:基于假病毒技术探究黄芩苷抗HIV-1活性作用.方法:利用HIV-1骨架质粒NL4-3 mCherry Luciferase、HIV-1包膜蛋白质粒pCMV-VSV-G和人胚肾细胞HEK-293T构建HIV-1假病毒药物筛选体系,并对该体系进行优化和安全性验证.测定黄芩苷对293T细胞活性、HIV-1假病毒活性、HIV-1逆转录酶(RT)活性、RNA依赖的DNA聚合酶(RDDP)活性以及核糖核酸酶H (RNase H)活性的影响.将黄芩苷分别与HIV-1 RT的晶体结构(2ZD1)、RNase H的晶体结构(3QIN)进行分子对接,探讨黄芩苷与HIV-1 RT、RNase H的相互作用及结合性能.结果:成功构建出了具有双报告检测基因的HIV-1假病毒药物筛选体系,该体系只有单轮感染活性;黄芩苷对293T细胞活性的抑制作用随浓度的增大而增加,黄芩苷在100μmol·L-1浓度以下对293T细胞的活力影响较小(P＞0.05);黄芩苷对HIV-1假病毒具有一定的抑制作用,给药浓度越高,其相应的萤光素酶基因和红色荧光基因表达则越低,在100 μmol·L-1高浓度下其抑制率可达60％左右;黄芩苷对HIV-1 RT活性和RNase H表现出明显的抑制作用(P＜0.05),且呈现浓度依赖性,其半数抑制浓度(IC50)分别约为58.4μmol·L-1、78.4 μmol· L-1;但黄芩苷对HIV-1 RDDP活性的抑制作用较弱,其IC50约为1.686 mmol·L-1;黄芩苷与HIV-1 RT、RNase H蛋白的结合区域均为对应的酶活区域,其分子对接打分值分别为|-10.991|、|-8.485|;黄芩苷能够与HIV-1 RT酶蛋白的LYS 101、ILE180氨基酸残基形成氢键作用,与TRP229氨基酸残基形成π-π作用,与VAL106、TYR181、TYR188、VAL108等氨基酸残基形成多个疏水作用;黄芩苷结构母核上的苯环可以与RNase H酶蛋白中的一个Mn2+形成一个阳离子-π作用,黄芩苷还能与GLY444、ASP498、GLN500、TYR501氨基酸残基形成氢键作用.结论:黄芩苷在体外具有较好的抗HIV-1活性,其主要的作用靶点为HIV-1 RT和HIV-1 RNase H.
文献关键词：
黄芩苷;HIV-1假病毒;逆转录酶;核糖核酸酶H;分子对接
中图分类号：
作者姓名：
庞晓军;黎东旺;陈丽华
作者机构：
钦州市第二人民医院,广西钦州535000;广西医科大学药学院,广西南宁530021
文献出处：
引用格式：
[1]庞晓军;黎东旺;陈丽华-.基于假病毒技术探讨黄芩苷抗HIV-1活性研究)[J].中国医院药学杂志,2022(02):129-135
A类：
RDDP,2ZD1,3QIN,ILE180,TRP229,VAL106,TYR181,TYR188,VAL108,GLY444,ASP498,GLN500,TYR501
B类：
假病毒,技术探讨,黄芩苷,HIV,活性研究,技术探究,质粒,NL4,mCherry,Luciferase,包膜蛋白,膜蛋白质,pCMV,VSV,人胚,胚肾,肾细胞,HEK,293T,毒药,药物筛选,安全性验证,细胞活性,病毒活性,逆转录酶,核糖核酸,核酸酶,RNase,晶体结构,分子对接,结合性能,双报告,单轮,给药浓度,萤光,酶基因,红色荧光,抑制率,浓度依赖性,半数抑制浓度,IC50,打分,LYS,氨基酸残基,氢键作用,疏水作用,母核,苯环,Mn2+,阳离子,作用靶点
AB值：
0.265607
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