目的:探讨生物钟基因 CLOCK、 BMAL1与多发性内分泌腺瘤病2型（multiple endocrine neoplasia 2，MEN2型）甲状腺髓样癌（medullary thyroid carcinoma，MTC）的相关性。 方法:回顾性分析2013年1月至2021年9月在青岛大学附属烟台毓璜顶医院病理确诊为MEN2型MTC的病例13例（男性8例，女性5例，年龄15~69岁）及同期随机选取的非MEN2型MTC病例13例（男性7例，女性6例，年龄33~74岁）。分析比较2组患者的临床指标，并利用免疫组织化学、实时荧光定量PCR（quantitative real time PCR，qPCR）等技术检测CLOCK、BMAL1在MEN2型MTC组织与癌旁组织、非MEN2型MTC组织间的表达差异；分析淋巴结转移数量与CLOCK、BMAL1表达相关性；蛋白互作（protein-protein interaction，PPI）网络分析结合qPCR和相关性分析挖掘MEN2常见突变基因 RET表达与生物钟基因间的表达调控关系；利用地塞米松节律同步化后脂多糖细胞刺激试验验证MEN2细胞节律紊乱特点。采用独立样本 t检验对数据进行分析。 结果:本研究MEN2型MTC病例呈现典型 RET基因突变；临床相关指标分析发现MEN2型MTC血清降钙素水平、肿瘤直径及转移淋巴结数量，均较非MEN2型MTC升高，差异均有统计学意义（ t值分别为2.76、2.53、2.26， P值均<0.05）。免疫组织化学结果显示，生物钟基因CLOCK、BMAL1在MEN2型MTC癌组织中高表达，而在癌旁正常甲状腺滤泡内阴性表达，且表达水平高于非MEN2型MTC；qPCR结果显示，在MEN2型MTC癌组织中 CLOCK基因表达量高于非MEN2型MTC以及癌旁正常组织的表达量，差异均有统计学意义（ t值分别为2.68和2.86， P值均<0.05）； BMAL1基因表达量高于非MEN2型MTC以及癌旁正常组织的表达量，差异均有统计学意义（ t值分别为2.21和2.35， P值均<0.05）。相关性分析发现MEN2型MTC患者 CLOCK、 BMAL1基因表达水平与淋巴结转移数量呈正相关（ r=0.65， P<0.001； r=0.52， P=0.005）。PPI网络分析发现RET和CLOCK间存在调控关系，依据qPCR结果做进一步的相关性分析，提示 CLOCK基因的表达和 RET基因的异常表达呈正相关（ r=0.96， P<0.001）。地塞米松节律同步化后再用脂多糖刺激离体培养的细胞发现同步化12 h时生物钟基因 CLOCK、 BMAL1在MEN2型MTC细胞中的表达（0.47±0.22、2.60±1.48）显著低于癌旁组织细胞中的表达（1.70±1.62、8.23±2.52），差异有统计学意义（ t=5.04， P=0.007； t=3.34， P=0.029）。 结论:生物钟基因 CLOCK、 BMAL1与MEN2型MTC的发生发展存在相关性，可能是MEN2型MTC新治疗策略开发的潜在靶点。

甲状腺肿瘤;甲状腺髓样癌;多发性内分泌腺瘤病2型;CLOCK;BMAL1

牟亚魁;任超;李玉梅;于国华;郑桂彬;宋昊;路丛先;田汝宪;宋西成

青岛大学附属烟台毓璜顶医院耳鼻咽喉头颈外科，烟台　264000;山东省耳鼻喉疾病临床医学研究中心，烟台　264000;华南肿瘤学国家重点实验室，广州　510000;青岛大学附属烟台毓璜顶医院泰山学者实验室，烟台　264000;青岛大学附属烟台毓璜顶医院神经内科，烟台　264000;青岛大学附属烟台毓璜顶医院病理科，烟台　264000;青岛大学附属烟台毓璜顶医院甲状腺外科，烟台　264000

中华耳鼻咽喉头颈外科杂志

[1]牟亚魁;任超;李玉梅;于国华;郑桂彬;宋昊;路丛先;田汝宪;宋西成-.生物钟基因与MEN2型甲状腺髓样癌相关性分析)[J].中华耳鼻咽喉头颈外科杂志,2022(09):1079-1086

生物钟基因,MEN2,甲状腺髓样癌,讨生,CLOCK,BMAL1,多发性内分泌腺瘤病,multiple,endocrine,neoplasia,medullary,thyroid,carcinoma,MTC,青岛大学,烟台,毓璜顶,临床指标,免疫组织化学,quantitative,real,qPCR,癌旁组织,表达差异,淋巴结转移数,蛋白互作,protein,interaction,PPI,突变基因,RET,表达调控,地塞米松,松节,同步化,脂多糖,节律紊乱,基因突变,临床相关指标,指标分析,血清降钙素,肿瘤直径,转移淋巴结,淋巴结数量,癌组织,滤泡,基因表达量,正常组织,基因表达水平,异常表达,离体培养,组织细胞,治疗策略,策略开发,潜在靶点,甲状腺肿瘤

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