[目的]美人鱼发光杆菌美人鱼亚种(Photobacteriumdamselaesubsp.damselae,PDD)是一种可导致多种海洋生物患病的重要病原菌.本研究以从我国海水养殖环境中分离的具有强磷脂酶活性、强溶血性表型且具有高致病性的2株PDD菌株为研究对象,分析PDD菌株胞外产物(extracellular products,ECP)的致病性及细胞毒性,及其与菌株致病性表型的相关性.[方法]利用培养基平板法测定菌株PDD1605、PDD1608的ECP体外磷脂酶活性和溶血性;通过人工感染实验测定PDD1605和PDD1608活菌株及其ECP对许氏平鲲的致病性,并进行组织病理切片观察组织的病理损伤;通过向人胚肾细胞系HEK293T和小鼠成纤维细胞系MCFS等2种培养细胞中添加菌株PDD1605和PDD1608的ECP测定其对哺乳动物的细胞毒性.[结果]人工感染PDD1605和PDD1608活菌株对许氏平鲉均表现为高致病性,5×108 CFU/mL的菌液浓度24 h内受试鱼全部死亡;菌株PDD1605和PDD1608的ECP对许氏平鲉同样表现为高致病性,受试鱼的死亡曲线与感染活菌株的死亡曲线趋势基本一致;病理切片观察发现,感染ECP后许氏平鲉组织发生明显病变,主要表现为肠黏膜层组织崩解,心脏心肌炎性细胞浸润,肝脏血细胞和炎性细胞浸润,脾脏出现血铁蛋白沉积等;2株PDD菌株的ECP也具有体外强溶血活性和强磷脂酶活性,与菌株的毒力特性基本一致;2株PDD菌株的ECP对人胚肾细胞系HEK293T和小鼠成纤维细胞系MCFS具有细胞损伤作用,均使体外培养的细胞体积萎缩,形成了圆形细胞簇等退行性变化.[结论]通过体外测定溶血性、磷脂酶活性,许氏平鲲人工感染实验和病理切片观察,以及细胞毒性研究,证实2株高致病性PDD菌株的致病性表型与其ECP致病性表型和细胞毒性高度一致,从而说明ECP是高致病性PDD菌株的重要致病机制之一.

美人鱼发光杆菌美人鱼亚种;胞外产物;毒力特性;细胞毒性;许氏平鲲

李永杰;于永翔;王印庚;王春元;刘定远;张浩;张正

上海海洋大学水产与生命学院,上海201306;中国水产科学研究院黄海水产研究所,农业农村部海水养殖病害防治重点实验室,山东青岛266071;青岛海洋科学与技术试点国家实验室,海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室,山东青岛266237

微生物学报

[1]李永杰;于永翔;王印庚;王春元;刘定远;张浩;张正-.高致病性美人鱼发光杆菌美人鱼亚种胞外产物的毒力特性分析)[J].微生物学报,2022(08):2995-3006

美人鱼发光杆菌美人鱼亚种,Photobacteriumdamselaesubsp,PDD1605,PDD1608,许氏平鲲

高致病性,胞外产物,毒力特性,海洋生物,海水养殖,养殖环境,磷脂酶,溶血性,extracellular,products,ECP,细胞毒性,人工感染,实验测定,活菌,病理切片,病理损伤,人胚,胚肾,肾细胞,细胞系,HEK293T,小鼠成纤维细胞,MCFS,哺乳动物,许氏平鲉,CFU,菌液浓度,观察发现,肠黏膜,黏膜层,崩解,心肌炎,炎性细胞浸润,血细胞,脾脏,血铁,铁蛋白,外强,溶血活性,细胞损伤,损伤作用,体外培养,细胞体,退行性变,外测,毒性研究,株高,高度一致,致病机制

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