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水溶性壳聚糖水凝胶对糖尿病小鼠感染全层皮肤缺损创面的作用及其机制
文献摘要：
目的:探讨水溶性壳聚糖水凝胶对糖尿病小鼠感染全层皮肤缺损创面的作用及其机制。方法:采用实验研究方法。采用循环冻融的方法制备由聚乙烯醇和明胶组成的对照水凝胶及由前述2种材料+水溶性壳聚糖组成的水溶性壳聚糖水凝胶。大体观察第1次冻融前后试管中2种敷料流动性，并比较12孔板中2种敷料最终形态的外观差异。取细胞株L929和HaCaT，均分别按照随机数字表法（分组方法下同）分为对照水凝胶组和水溶性壳聚糖水凝胶组，分别加入相应敷料培养24 h，采用细胞计数试剂盒8检测细胞增殖活力。取兔血红细胞悬液，分为生理盐水组、聚乙二醇辛基苯基醚（Triton X-100）组、对照水凝胶组和水溶性壳聚糖水凝胶组，分别作相应处理后孵育1 h，采用酶标仪检测红细胞的溶血程度。取24只11~14周龄雌性db/db小鼠，在其背部制作全层皮肤缺损创面并在创面处滴加耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）液，72 h后将小鼠分为空白对照组、磺胺嘧啶银水胶组、对照水凝胶组、水溶性壳聚糖水凝胶组，分别作相应处理。伤后0（即刻）、7、14、21 d，大体观察创面愈合情况并计算伤后14、21 d创面愈合率；伤后14 d，检测创面中MRSA浓度；伤后21 d，采用苏木精-伊红染色法对创面进行组织学分析，采用免疫荧光法检测创面中细胞CD31表达并计算其阳性百分率。取Raw264.7细胞，分为进行相应处理的白细胞介素4（IL-4）组、空白对照组、对照水凝胶组、水溶性壳聚糖水凝胶组，培养48 h，采用流式细胞仪检测细胞中CD206阳性细胞百分率。样本数均为3。对数据行独立样本 t检验、单因素方差分析、重复测量方差分析、LSD检验及 Dunnett T3检验。 结果:试管中2种敷料在进行冻融前都具有一定的流动性，冻融1次后均形成半固态凝胶。12孔板中2种敷料最终形态均基本呈稳定的半透明片状，透明度差异不大。培养24 h，水溶性壳聚糖水凝胶组L929和HaCaT的细胞增殖活力均明显高于对照水凝胶组（ t值分别为6.37、7.50， P<0.01）。孵育1 h，水溶性壳聚糖水凝胶组红细胞溶血程度明显低于Triton X-100组（ P<0.01），而与生理盐水组及对照水凝胶组均相近（ P>0.05）。伤后0 d，4组小鼠创面情况相似。伤后7 d，空白对照组与对照水凝胶组创面内部淡黄色渗出物较多，磺胺嘧啶银水胶组与水溶性壳聚糖水凝胶组创面观察到少量渗出。伤后14 d，空白对照组与对照水凝胶组创面干燥结痂，无明显上皮覆盖；磺胺嘧啶银水胶组创面痂皮脱落，可见脓性渗出物；水溶性壳聚糖水凝胶组创面基底呈淡红色，创面可观察到明显上皮覆盖。伤后14 d，水溶性壳聚糖水凝胶组创面愈合率显著高于其他3组（ P值均<0.01）。伤后21 d，水溶性壳聚糖水凝胶组创面已完全闭合，其他3组创面均未完全愈合；水溶性壳聚糖水凝胶组创面愈合率显著高于其他3组（ P值均<0.01）。伤后14 d，水溶性壳聚糖水凝胶组创面的MRSA浓度明显低于空白对照组（ P<0.01），但与对照水凝胶组和磺胺嘧啶银水胶组均相近（ P>0.05）。伤后21 d，空白对照组创面新生表皮缺损严重；对照水凝胶组创面的表皮亦有大面积缺损；磺胺嘧啶银水胶组创面尚未形成完整新生表皮；水溶性壳聚糖水凝胶组创面不仅被新生表皮完全覆盖，且新生表皮基底细胞排列规整。伤后21 d，水溶性壳聚糖水凝胶组创面中CD31阳性百分率为（2.19±0.35）%，明显高于空白对照组的（0.18±0.05）%、对照水凝胶组的（0.23±0.06）%以及磺胺嘧啶银水胶组的（0.62±0.25）%， P值均<0.01。培养48 h，水溶性壳聚糖水凝胶组Raw264.7中CD206阳性细胞百分率明显低于IL-4组（ P<0.01），但明显高于空白对照组与对照水凝胶组（ P<0.05或 P<0.01）。 结论:水溶性壳聚糖水凝胶生物安全性好，较不含水溶性壳聚糖的对照水凝胶能诱导更高水平的巨噬细胞M2型极化，因此可以提升糖尿病小鼠MRSA感染的全层皮肤缺损创面的修复效果，并促进创面快速愈合。
文献关键词：
水凝胶;壳聚糖;感染;皮肤;慢性创面;创面修复
中图分类号：
作者姓名：
朱萌;陈禹州;区锦钊;李曌;黄沙;胡骁骅;鞠晓燕;田野;牛忠伟
作者机构：
中国科学院理化技术研究所 中国科学院光化学转换与功能材料重点实验室，北京 100190;解放军总医院医学创新研究部创伤修复与组织再生研究中心，北京 100048;北京积水潭医院烧伤科，北京 100035
文献出处：
引用格式：
[1]朱萌;陈禹州;区锦钊;李曌;黄沙;胡骁骅;鞠晓燕;田野;牛忠伟-.水溶性壳聚糖水凝胶对糖尿病小鼠感染全层皮肤缺损创面的作用及其机制)[J].中华烧伤与创面修复杂志,2022(10):923-931
A类：
B类：
水溶性,壳聚糖水凝胶,糖尿病小鼠,层皮,皮肤缺损,实验研究方法,循环冻融,聚乙烯醇,醇和,明胶,前述,试管,敷料,孔板,细胞株,L929,HaCaT,组方,下同,别加,试剂盒,细胞增殖活力,红细胞悬液,生理盐水,聚乙二醇辛基苯基醚,Triton,孵育,酶标仪,周龄,雌性,db,背部,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,MRSA,空白对照,磺胺嘧啶银,水胶,即刻,愈合情况,创面愈合率,苏木,木精,伊红,染色法,组织学分析,免疫荧光法,CD31,百分率,Raw264,流式细胞仪,CD206,阳性细胞,单因素方差分析,重复测量方差分析,LSD,Dunnett,半固态,半透明,透明度,红细胞溶血,淡黄色,渗出物,结痂,淡红色,全愈,大面积缺损,基底细胞,规整,生物安全性,更高水平,巨噬细胞,M2,修复效果,慢性创面,创面修复
AB值：
0.174875
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