目的:探讨载P311微球的温敏壳聚糖水凝胶对大鼠全层皮肤缺损创面愈合的影响。方法:采用实验研究方法。通过油包水乳化法制备聚乙烯醇/海藻酸钠微球（单纯微球）、P311微球及异硫氰酸荧光素标记的牛血清白蛋白（FITC-BSA）微球，于光学显微镜/倒置荧光显微镜下观察形貌。制备壳聚糖溶液，将壳聚糖溶液和β-磷酸甘油二钠水合物混合制备单纯温敏水凝胶，在单纯温敏水凝胶中加入相应物质制备载单纯微球和载P311微球的温敏水凝胶，观察4种液体在37 ℃时倾斜状态下的形态变化，冷冻干燥后于扫描电子显微镜下观察微观形貌。取18只3~4周龄雄性SD大鼠，分为不进行任何处理的正常组及于背部脊柱两侧分别制作1个全层皮肤缺损创面并进行相应处理的敷贴组、壳聚糖组、单纯水凝胶组、载单纯微球水凝胶组、载P311微球水凝胶组，每组3只。取5组全层皮肤缺损大鼠，于伤后0（即刻）、5、10、15 d 观察创面愈合情况，计算伤后5、10、15 d创面愈合率；取5组全层皮肤缺损大鼠伤后15 d创面和创缘组织及正常组大鼠相同部位正常皮肤组织，行苏木精-伊红染色观察组织学变化，行免疫组织化学染色观测CD31及血管内皮生长因子（VEGF）的表达，采用蛋白质印迹法检测CD31及VEGF的蛋白表达。样本数均为3。对数据行单因素方差分析、重复测量方差分析及Bonferroni校正。结果:单纯微球呈球形，表面疏松多孔；P311微球及FITC-BSA微球表面光滑无孔隙，且FITC-BSA微球散发出均匀的绿色荧光；3种微球直径基本一致，为33.1~37.7 μm。在37 ℃时倾斜状态下，与壳聚糖溶液及单纯温敏水凝胶相比，载微球的2种水凝胶结构更稳定。载微球的2种水凝胶网状结构较壳聚糖溶液、单纯温敏水凝胶更致密，且其横断面可见直径约30 μm的微球。伤后15 d内，5组大鼠创面均不同程度愈合，其中载P311微球水凝胶组大鼠创面愈合情况最好。敷贴组、壳聚糖组大鼠伤后5、10、15 d创面愈合率分别为（26.6±2.4）%、（38.5±3.1）%、（50.9±1.5）%，（47.6±2.0）%、（58.5±3.6）%、（66.7±4.1）%，均明显低于载P311微球水凝胶组的（59.3±4.8）%、（87.6±3.2）%、（97.2±1.0）%， P<0.05或 P<0.01；单纯水凝胶组大鼠伤后10、15 d及载单纯微球水凝胶组大鼠伤后15 d创面愈合率分别为（76.0±3.3）%、（84.5±3.6）%、（88.0±2.6）%，均明显低于载P311微球水凝胶组（ P<0.05）。正常组大鼠正常皮肤中可见表皮、毛囊及皮脂腺，未见CD31和VEGF阳性表达；载P311微球水凝胶组大鼠伤后15 d创面已几乎完全上皮化，创面血管、毛囊、皮脂腺生成及CD31和VEGF阳性表达较其他4组全层皮肤缺损大鼠明显增加，CD31和VEGF蛋白表达均较其余5组大鼠明显增加（ P<0.01）。 结论:载P311微球的温敏壳聚糖水凝胶，可以缓释包载的药物，延长药物作用时间，并通过促进创面血管生成及再上皮化，促进全层皮肤缺损大鼠创面愈合。

生物相容性材料;水凝胶;微球体;P311;血管生成;创面修复

张清荣;陈长友;徐娜;吕大伦;贾杰只;李文红;罗高兴;于云龙;张逸

南通大学附属医院烧伤整形外科，南通　226001;陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院全军烧伤研究所，创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室，重庆市疾病蛋白质组学重点实验室，重庆　400038;皖南医学院第一附属医院烧伤整形外科，芜湖　241001;北京桀亚莱福生物技术有限责任公司，北京　100094

中华烧伤与创面修复杂志

[1]张清荣;陈长友;徐娜;吕大伦;贾杰只;李文红;罗高兴;于云龙;张逸-.载P311微球的温敏壳聚糖水凝胶对大鼠全层皮肤缺损创面愈合的影响)[J].中华烧伤与创面修复杂志,2022(10):914-922

P311

壳聚糖水凝胶,层皮,皮肤缺损,实验研究方法,过油,油包水,乳化法,聚乙烯醇,海藻酸钠,异硫氰酸荧光素,荧光素标记,牛血清白蛋白,FITC,BSA,光学显微镜,倒置,荧光显微镜,显微镜下,糖溶液,磷酸甘油,水合物,混合制,温敏水凝胶,应物,倾斜状态,形态变化,冷冻干燥,微观形貌,周龄,及于,背部,脊柱,敷贴,纯水,即刻,愈合情况,创面愈合率,创缘,皮肤组织,苏木,木精,伊红,免疫组织化学染色,CD31,血管内皮生长因子,VEGF,蛋白质印迹法,单因素方差分析,重复测量方差分析,Bonferroni,松多,表面光,散发出,凝胶结构,更稳,网状结构,横断面,直径约,毛囊,皮脂腺,阳性表达,包载,药物作用,作用时间,血管生成,再上皮化,生物相容性材料,微球体,创面修复

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