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基于Vero E6细胞的水痘-带状疱疹病毒抗膜抗原荧光抗体试验的建立与评价
文献摘要：
目的 建立并评价基于非洲绿猴肾细胞(Vero E6)的水痘-带状疱疹病毒(VZV)抗膜抗原荧光抗体(FA-MA)试验方法.方法 在VZV-Oka减毒活疫苗株在Vero E6细胞中的适应培养毒株VZV-Oka-E6的基础上,首先使用3个不同感染剂量(104.65、104.95和105.25 TCID50)的VZV-Oka-E6病毒株感染Vero E6细胞,于显微镜下观察病变情况确定最佳的VZV-Oka-E6病毒株感染量;然后对比使用不同固定液固定感染细胞后制备的固定抗原片可检测到的灵敏度确定最优的固定液,从而建立基于Vero E6细胞的中和抗-VZV检测FAMA试验方法;采用建立的FAMA法,检测不同效价的VZV免疫球蛋白国际标准品,确定该方法的敏感性;检测人单纯疱疹病毒(HSV)1、2型特异性抗体,评价该方法的特异性;分别使用同一批次制备和4个不同批次制备的VZV感染细胞固定抗原片检测VZV免疫球蛋白国际标准品的中和抗-VZV,确定该方法的批内和批间重复性;检测已知的3种效价的VZV免疫球蛋白国际标准品,评价该方法的相对准确性.分别应用新建立FAMA法和ELISA法检测20(人)份单采血浆样品的抗-VZV效价,对2种试验检测结果做Spearman相关性分析.结果 通过优化确定了 FAMA试验中最佳的VZV-Oka-E6病毒株感染量为105.25 TCID50,-20℃预冷的丙酮作为固定液.FAMA试验检测中和抗-VZV效价的灵敏度为31.25 mIU/mL;检测HSV 1、2型特异性抗体时结果为阴性;使用同一批次和4个不同批次制备的VZV感染细胞固定抗原片检测VZV免疫球蛋白国际标准品,变异系数分别为29.95％和26.71％;对3种效价VZV免疫球蛋白国际标准品的检测(值)与其理论值一致;FAMA法和ELISA法对20份单采血浆样品检测抗-VZV结果的相关系数为0.268.结论 所建立的FAMA试验检测中和抗-VZV效价具有良好的敏感性、特异性、重复性和相对准确性,可用于单采血浆和水痘-带状疱疹免疫球蛋白(VZIG)产品的中和抗-VZV效价检测.
文献关键词：
抗膜抗原荧光抗体(FAMA)试验;水痘-带状疱疹病毒(VZV);非洲绿猴肾细胞(Vero E6);中和抗-VZV;水痘-带状疱疹免疫球蛋白(VZIG)
中图分类号：
作者姓名：
袁典;王卓;贾俊婷;杨姝;孙珍珠;汪琳;王蕊;章金刚;马玉媛
作者机构：
军事科学院军事医学研究院卫生勤务与血液研究所国家药品监督管理局血液制品质量控制重点实验室,北京100850;美兆健康管理中心武汉中央商务区
文献出处：
引用格式：
[1]袁典;王卓;贾俊婷;杨姝;孙珍珠;汪琳;王蕊;章金刚;马玉媛-.基于Vero E6细胞的水痘-带状疱疹病毒抗膜抗原荧光抗体试验的建立与评价)[J].中国输血杂志,2022(10):999-1004
A类：
VZIG
B类：
Vero,E6,水痘,带状疱疹病毒,荧光抗体,建立与评价,肾细胞,VZV,Oka,减毒活疫苗,疫苗株,毒株,感染剂量,TCID50,显微镜下,固定液,原片,FAMA,免疫球蛋白,国际标准,标准品,单纯疱疹病毒,HSV,特异性抗体,对准,单采,采血,试验检测,预冷,丙酮,mIU,理论值,样品检测,效价检测
AB值：
0.162588
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