背景与目的:笔者前期研究发现,长链非编码RNA FoxP4-AS1(IncRNA FoxP4-AS1)在甲状腺乳头状癌(PTC)组织中异常表达,其低表达是PTC区域淋巴结转移的独立危险因素,但其功能及作用机制尚不清楚.因此,本研究探讨lncRNAFoxP4-AS1在PTC细胞中的表达,初步分析其对PTC细胞生物学行为的影响.方法:用qRT-PCR检测PTC细胞系(TPC-1、K1细胞)和正常甲状腺滤泡上皮细胞(Nthy-ori3-1细胞)中lncRNA FoxP4-AS1的表达;将TPC-1、K1细胞分别转染FoxP4-AS1过表达慢病毒载体和空载病毒载体(阴性对照)后,并分别用CCK-8实验、克隆形成实验、EdU、Transwell实验、流式细胞术分析细胞生物学功能的变化;通过GEPIA数据库和LncTar网站预测FoxP4-AS1的靶基因,并用Western blot进行验证.用以上转染后的细胞构建小鼠皮下移植瘤模型,观察移植瘤的生长情况,免疫组化检测瘤组织Ki-67的表达.通过KEGG数据库初步分析FoxP4-AS1可能影响的信号通路.结果:qRT-PCR结果显示,与正常甲状腺滤泡上皮细胞比较,lncRNA FoxP4-AS1在两种PTC细胞中的表达水平均明显降低(均P＜0.05).细胞功能实验显示,转染FoxP4-AS1过表达慢病毒载体的TPC-1、K1细胞增殖活力明显减弱、侵袭和迁移能力均较阴性对照组细胞明显降低,且细胞周期阻滞在G0/G1期(均P＜0.01).GEPIA数据库和LncTar网站预测FoxP4-AS1与CDK4存在潜在的相互作用靶点,Western blot结果显示,转染FoxP4-AS1过表达慢病毒载体两种细胞的CDK4/cyclinD1表达水平较各自阴性对照组细胞明显降低(均P＜0.05).皮下移植瘤实验结果显示,转染FoxP4-AS1过表达慢病毒载体的PTC细胞较转染空载病毒载体的PTC细胞在小鼠体内生长慢,形成的瘤体小,且瘤组织中Ki-67表达减少.KEGG通路富集分析显示,FoxP4-AS1低表达主要富集于PI3K-Akt-mTOR通路、细胞周期、细胞凋亡、免疫调节相互作用,FoxP4-AS1高表达主要富集于DNA甲基化、氧化应激通路等.结论:lncRNA FoxP4-AS1在PTC细胞中表达下调,且与PTC细胞的恶性生物学行为密切相关,FoxP4-AS1可能通过抑制CDK4/cyclinD1表达抑制PTC细胞增殖,作为保护性因素发挥作用.

甲状腺肿瘤;RNA;长链非编码;细胞增殖;肿瘤浸润

杨惠芳;汤蕊;罗雪;高庆军;陈星宏;赵代伟

贵州医科大学临床医学院,贵州贵阳550000;贵州省毕节市第一人民医院甲状腺外科,贵州毕节551700;贵州医科大学附属医院甲状腺外科,贵州贵阳550000;贵州省第二人民医院甲状腺外科,贵州贵阳550004

中国普通外科杂志

[1]杨惠芳;汤蕊;罗雪;高庆军;陈星宏;赵代伟-.甲状腺乳头状癌细胞中长链非编码RNA FoxP4-AS1的表达及其生物学功能)[J].中国普通外科杂志,2022(05):619-630

FoxP4,lncRNAFoxP4,LncTar

甲状腺乳头状癌,癌细胞,长链非编码,AS1,前期研究,IncRNA,PTC,异常表达,低表达,区域淋巴结转移,初步分析,细胞生物学行为,qRT,细胞系,TPC,K1,甲状腺滤泡上皮细胞,Nthy,ori3,转染,过表达,慢病毒载体,空载,CCK,克隆形成,EdU,Transwell,流式细胞术,细胞生物学功能,GEPIA,靶基因,blot,皮下移植瘤模型,生长情况,免疫组化检测,Ki,细胞功能实验,细胞增殖活力,侵袭和迁移,迁移能力,细胞周期阻滞,G0,G1,CDK4,作用靶点,cyclinD1,瘤体,通路富集分析,PI3K,Akt,mTOR,免疫调节,甲基化,恶性生物学行为,表达抑制,保护性因素,甲状腺肿瘤,肿瘤浸润

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