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胱天蛋白酶募集域蛋白9在胰腺腺泡细胞导管组织转化中的作用
文献摘要：
目的:探讨巨噬细胞胱天蛋白酶募集域蛋白9(card9)在胰腺腺泡细胞导管组织转化中的作用。方法:构建3条靶向card9的小分子干扰RNA(siRNA-card9)，荧光显微镜下观察转染巨噬细胞的荧光强度，采用实时定量PCR法检测巨噬细胞card9 mRNA表达量，筛选巨噬细胞的最佳转染效率。将5×10
5巨噬细胞和100 μg/ml β葡聚糖体外常规培养12、24 h后，分成阳性细胞组(巨噬细胞)、β葡聚糖刺激阳性细胞组、阴性细胞组(card9
－/－巨噬细胞)、β葡聚糖刺激阴性细胞组，采用蛋白质免疫印迹法检测各组巨噬细胞card9蛋白表达水平。取1×10
5巨噬细胞、1×10
5胰腺腺泡细胞加入Transwell小室上下层共培养120 h后，分为阳性细胞组(巨噬细胞+腺泡细胞)、100和500 μg/ml β葡聚糖刺激阳性细胞组、阴性细胞组(card9
－/－巨噬细胞+腺泡细胞)、100和500 μg/ml β葡聚糖刺激阴性细胞组，取下室的胰腺腺泡细胞，采用免疫荧光化学染色法检测腺泡细胞导管组织转化标志物CK19蛋白表达。
结果:siRNA-card9转染巨噬细胞24 h荧光强度最强，浓度为200 nmol/L时抑制效率最高。阳性细胞组、β葡聚糖刺激阳性细胞组、阴性细胞组、β葡聚糖刺激阴性细胞组培养24 h后，巨噬细胞card9蛋白表达量分别为0.81±0.05、1.46±0.05、0.42±0.06、0.46±0.06，β葡聚糖刺激阳性细胞组较阳性细胞组显著升高，差异具有统计学意义(
P<0.05)。100和500 μg/ml β葡聚糖刺激阳性细胞组腺泡细胞内CK19绿色荧光较阳性细胞组明显增强，且呈β葡聚糖剂量依赖性；而阴性细胞组、100和500 μg/ml β葡聚糖刺激阴性细胞组腺泡细胞内CK19绿色荧光强度均较阳性细胞组显著降低。
结论:巨噬细胞card9表达水平升高可诱导腺泡细胞导管组织转化，提示可能存在card9介导的胰腺癌发病机制。
文献关键词：
巨噬细胞;胱天蛋白酶募集域蛋白9;胰腺;腺泡细胞;导管组织转化
中图分类号：
作者姓名：
李清华;杨志文
作者机构：
上海市松江区中心医院消化内科，上海 201600;上海市松江区中心医院药剂科，上海 201600
文献出处：
引用格式：
[1]李清华;杨志文-.胱天蛋白酶募集域蛋白9在胰腺腺泡细胞导管组织转化中的作用)[J].中华胰腺病杂志,2022(04):278-282
A类：
导管组织转化,card9,card9
B类：
胱天蛋白酶,募集,胰腺腺泡细胞,巨噬细胞,小分子干扰,siRNA,荧光显微镜,显微镜下,荧光强度,实时定量,转染效率,10
,ml,葡聚糖,规培,成阳,阳性细胞,蛋白质免疫印迹,免疫印迹法,蛋白表达水平,Transwell,小室,共培养,取下,免疫荧光化学染色,染色法,CK19,nmol,抑制效率,组培,明显增强,剂量依赖,量依赖性,胰腺癌
AB值：
0.153748
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