目的:探究中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)在加重特发性膜性肾病(IMN)内皮功能紊乱并促进高凝形成、疾病进展中的作用.方法:根据KDIGO指南诊断标准,筛选年龄在18～80岁之间且于2019年3月—2020年12月在哈尔滨医科大学附属第一医院肾内科行肾活检病理诊断为IMN,病理分期为Ⅱ、Ⅲ期的患者,行双下肢彩超或双肾血管彩超,根据彩超对于急慢性血栓的诊断标准排除陈旧血栓影响,分为有血栓组、无血栓组各20例为IMN组,再选取健康者20例为对照组.采集实验对象空腹外周静脉血,分离血浆测定各组血浆中细胞外DNA(cell free-DNA,cf-DNA)、骨髓过氧化物酶(MPO)-DNA复合物、甲肾上腺素(NE)的含量.用IMN组患者及对照组血浆刺激正常中性粒细胞进行NETs生成实验,通过免疫荧光显微镜观察NETs结构,并进行NETs提取,进一步进行内皮刺激实验,采用人脐静脉内皮细胞(HUVECs),观察内皮结构以及促凝表型转变.进行DNA酶(Dnase)及抗组织因子抑制实验,观察NETs的生成与凝血间的关系.结果:与对照组相比,IMN组外周血NETs相关指标明显上升,有血栓组较无血栓组上升更明显.IMN组较对照组血浆更易刺激中性粒细胞生成NETs,有血栓组较无血栓组生成NETs更明显.与对照组相比,IMN组表现为凝血时间明显缩短,凝血酶-抗凝血酶复合体(TAT)明显增加,有血栓组较无血栓组更明显,对有血栓组进行抑制试验,发现anti-TF、Dnase I能明显逆转这一现象.当内皮受到NETs刺激后,内皮间正常连接消失,间隙增大,同时内皮表达TF明显升高,表现为促凝表型.结论:NETs加剧内皮功能紊乱并驱动血栓倾向.针对NETs形成的策略可能为IMN提供一种潜在的治疗方法.

特发性膜性肾病;凝血;中性粒细胞胞外诱捕网;内皮细胞

禹程远;陈晓静;王姣姣;解汝娟

深圳市人民医院老年病科,广东 深圳,518020;西安市红会医院内科,陕西 西安 710000;哈尔滨医科大学附属第一医院内科,黑龙江 哈尔滨 150000

黑龙江医学

[1]禹程远;陈晓静;王姣姣;解汝娟-.探究中性粒细胞胞外诱捕网加重特发性膜性肾病内皮功能紊乱并促进高凝状态形成)[J].黑龙江医学,2022(07):773-778

Dnase

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