目的 探讨KLF7对创伤性脑损伤诱导海马神经元细胞(HT22细胞)增殖、凋亡损伤作用及其机制.方法 HT22细胞培养和TBI体外模型(stretch联合OGD)制备,应用AAV-KLF7、AAV-NC腺病毒转染HT22,将细胞分为control组(未处理细胞)、SOAN组(stretch+OGD处理后应用AAV-NC转染)、SOAK组(stretch+OGD处理后应用AAV-KLF7转染)、SOAK-AG490)(SOAK组加入AG490)和SOAN-AG490组(SOAN组加入AG490),应用Western blots和qRT-PCR检测各组KLF7及p-JAK2、t-JAK2、p-STAT3、t-STAT3、凋亡因子Bcl-2、Bax和C-caspase3表达水平;免疫荧光染色检测各组KLF7及βⅢ-tubulin表达,乳酸脱氢酶(LDH)活性试剂盒测定各组LDH表达,Caspase-3活性试剂盒检测各组Caspase-3活性;PI免疫荧光染色及CCK-8法检测各组细胞增殖和活性情况;ChIP检测转录因子KLF7与STAT3启动子的结合作用和结合位点.结果 与control组比较,stretch+OGD损伤后KLF7表达、PI阳性细胞百分比、LDH和caspase-3活性、p-JAK2/t-JAK2和p-STAT3/t-STAT3比值、Bax和C-caspase-3蛋白表达均显著增高;细胞活性、βⅢ-tubulin和Bcl-2表达均显著降低(P<0.05);与SOAN组比较,SOAK组KLF7表达、细胞活性、βⅢ-tubulin和Bcl-2表达、p-JAK2/t-JAK2和p-STAT3/t-STAT3比值均显著增高,PI阳性细胞百分比、LDH和caspase-3活性、Bax和C-caspase-3蛋白表达均显著降低(P<0.05);SOAK-AG490组PI阳性细胞百分率、LDH和caspase3活性增加,p-JAK2/t-JAK2和p-STAT3/t-STAT3相对表达及细胞活力降低(P<0.05).SOAN、SOAN-AG490、SOAK-AG490三组间PI阳性细胞百分率、LDH和caspase3活性、Bcl-2、Bax和C-caspase-3蛋白表达和细胞活力无显著性差异(P>0.05).ChIP结果表明KLF7与p-STAT3之间有直接相互作用.结论 KLF7能够抑制海马神经元TBI损伤细胞模型凋亡,机制可能与上调JAK2/STAT3信号通路表达有关.

创伤性脑损伤;细胞模型;KLF7;凋亡;海马神经元

牡丹江医学院神经组织工程研究所,黑龙江 牡丹江 157011;厦门医学院附属第二医院,福建 厦门 361000

[1]马多;李文媛;王晓宇;喻静;吕忠孝;王莹-.KLF7对创伤性脑损伤海马神经元细胞模型凋亡和增殖的影响)[J].牡丹江医学院学报,2022(03):1-7,29

SOAN,stretch+OGD,SOAK

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