典型文献
辣椒土传病原菌三重PCR检测体系的建立与应用
文献摘要：
[目的]建立简便、快速、准确同时检测辣椒疫霉(Phytophthora capsici)、白绢病菌(Sclerotium rolfsii)和青枯病菌(Ralstonia solanacearum)的多重PCR检测体系,为辣椒多种土传病害同时早期诊断提供技术支撑.[方法]以3种辣椒土传病害病原菌辣椒疫霉、白绢病菌和青枯病菌为研究对象,参考相关文献筛选出3种病原菌的3对特异性引物PCA1F/PCA1R、SCR-F/SCR-R和RalfliC-F/RalfliC-R,以引物浓度、退火温度、循环次数及延伸时间为变异因子,探索最佳反应体系,建立三重PCR检测方法,并基于田间实际发病样品对方法进行验证.[结果]优化的三重PCR反应体系25.0 μL:3对引物PCA1F/PCA1R、SCR-F/SCR-R和RalfliC-F/RalfliC-R浓度分别为0.24、0.24和0.28 μmol/L,DNA模板各10 ng,2×Multiplex PCR Mix 12.5 μL,ddH2O补足至25.0 μL.最佳扩增程序:94℃预变性1 min;94℃30 s,55.8℃30 s,72℃45 s,进行35个循环;72℃延伸10 min.建立的三重PCR体系可分别扩增出352、540和724 bp的特异性目的片段,体系灵敏度达10-1 ng/μL.利用建立的反应体系,对来自江西省不同市(县)的54份辣椒和土壤样品进行检测,样品检出率为100％.[结论]建立的三重PCR检测体系可对辣椒田间发病植株和土壤中辣椒疫霉、白绢病菌和青枯病菌进行快速、准确检测,可应用于辣椒多种土传病害并发的早期预防和流行监测.
文献关键词：
辣椒;三重PCR;辣椒疫霉;白绢病菌;青枯病菌
中图分类号：
作者姓名：
邹芬;何烈干;李湘民;黄瑞荣;马辉刚
作者机构：
江西省农业科学院植物保护研究所,江西南昌 330200
文献出处：
引用格式：
[1]邹芬;何烈干;李湘民;黄瑞荣;马辉刚-.辣椒土传病原菌三重PCR检测体系的建立与应用)[J].南方农业学报,2022(12):3453-3459
A类：
PCA1F,PCA1R,RalfliC
B类：
土传病原菌,检测体系,建立与应用,同时检测,辣椒疫霉,Phytophthora,capsici,白绢病菌,Sclerotium,rolfsii,青枯病菌,Ralstonia,solanacearum,土传病害,害病,文献筛选,特异性引物,SCR,退火温度,循环次数,变异因子,反应体系,立三,于田,田间,Multiplex,Mix,ddH2O,补足,增程,bp,土壤样品,品检,植株,早期预防,流行监测
AB值：
0.289858
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