目的 探究枸杞多糖(LBP)对UVA诱导细胞黑色素生成的影响.方法 用不同浓度LBP(0、20、50、100、200、300、400、500 μg/mL)处理HaCaT细胞和HEM细胞,采用CCK8 法检测对细胞增殖的影响,筛选出适宜浓度的LBP进行后续实验.使用300 μg/mL LBP、20 μMN-1A处理被30 J/cm2 UVA照射的HaCaT细胞和HEM细胞,多巴氧化法测定细胞中tyrosinase 活性、NaOH裂解法测定黑色素含量.通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测 LBP对细胞内α-MSH蛋白表达的调控,应用Western blot检测细胞黑色素生成相关蛋白MITF、tyrosinase、TRP1和TRP2的表达水平.结果 CCK8实验结果提示,当LBP浓度等于300 μg/mL时,HaCaT细胞和HEM细胞的增殖无明显变化(t=1.89、0.07,P=0.107、0.947).相较于 UVA 组,LBP 在体外可以明显抑制 UVA 诱导的 HEM细胞中 tyrosinase 活性(t =33.19,P=0.001)以及减低黑色素含量(t =7.13,P=0.019);ELISA 结果提示,UVA 照射可以促进HaCaT细胞和HEM细胞的α-MSH蛋白分泌(t =－3.79、－3.41,P=0.043、0.046),LBP能够抑制HaCaT细胞和HEM细胞中α-MSH的蛋白表达水平(t=3.75、3.41,P=0.044、0.048);Western blot结果显示,LBP可显著下调UVA诱导的黑色素生成相关蛋白MITF、tyrosinase、TRP1和TRP2的表达.结论 LBP可显著抑制UVA诱导的细胞黑色素生成,其机制可能通过调控HaCaT细胞和HEM细胞中α-MSH蛋白水平实现.

枸杞多糖;紫外线;α-MSH;黑色素

肖常青;陈教全;唐奕;欧珊珊;李华平;彭丽倩;李振洁;朱慧兰

广州市皮肤病防治所,广东 广州 510095

皮肤性病诊疗学杂志

[1]肖常青;陈教全;唐奕;欧珊珊;李华平;彭丽倩;李振洁;朱慧兰-.枸杞多糖通过调控α-MSH蛋白的表达抑制UVA诱导的细胞黑色素生成)[J].皮肤性病诊疗学杂志,2022(05):406-411

TRP1,TRP2

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