目的 通过构建脓毒症肺损伤体内及体外模型,探讨外源性白细胞介素-4(IL-4)可否减轻脓毒症急性肺损伤及其可能的调节机制.方法 细胞实验:体外培养小鼠肺泡巨噬细胞MH-S,选用终浓度为1.0 μg/mL的脂多糖(LPS)刺激2 h后,加入不同浓度的IL-4作用24 h,CCK-8法检测细胞活力;活性氧(ROS)测定试剂盒检测ROS的含量,Elish法检测IL-1β、IL-6、TNF-α表达水平,Western blot法检测NF-κB p65蛋白表达水平.小鼠实验:选用C57BL/6小鼠,随机分为空白对照组(生理盐水)、模型组(LPS)及实验组(LPS造模30 min后气管滴注IL-4),12 h后,将3组小鼠经异氟醚诱导后处死收集血清和组织样本.使用H&E染色法观察肺损伤,采用qRT-PCR和ELISA法检测相关基因的表达,流式细胞术检测巨噬细胞的极化情况.结果 外源性IL-4可明显改善肺损伤.体外实验表明,外源性IL-4在24 h内对MH-S细胞的活力几乎无影响;外源性IL-4能够降低MH-S细胞中TNF-α、IL-6、IL-Iβ水平,下调NF-κB p65蛋白表达量以及减少ROS的表达(P＜0.05).体内实验表明,外源性IL-4通过下调相关基因的表达增加了 F4/80+CD206+M2样巨噬细胞,抑制了 F4/80+iN-OS+M1样巨噬细胞的分布(P＜0.05).此外,外源性IL-4可以影响小鼠iNOS、TNF-α、MCP-1、IL-10的蛋白表达,同时LPS诱导的p65水平升高也被外源性IL-4所抑制.结论 外源性IL-4能够抑制促炎细胞因子的表达、减少ROS生成、降低肺组织病理评分和W/D值,对改善肺损伤有积极作用.此外,外源性IL-4可促进巨噬细胞极化,并抑制NF-KB/p65信号通路激活.

外源性白细胞介素-4;NF-κB;脓毒症;急性肺损伤

陈梦飞;王颖;白雪;杨丽婷;张玲

宁夏回族自治区人民医院急诊科,宁夏银川750002;宁夏医科大学,宁夏银川750004

宁夏医学杂志

[1]陈梦飞;王颖;白雪;杨丽婷;张玲-.外源性IL-4通过抑制NF-κB信号通路减轻急性脓毒症肺损伤的研究)[J].宁夏医学杂志,2022(06):488-492

Elish,80+CD206+M2,80+iN,OS+M1

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