目的 探索夏枯草抑制儿童甲状腺癌的有效成分及潜在作用机制.方法 通过检索中医药系统药理学(traditional Chinese medicine systems pharmacology,TCMSP)、GeneCards数据库获取夏枯草抑制儿童甲状腺癌的潜在靶点和候选药效成分.采用Cytoscape软件构建药物-成分-靶点-疾病网络,对潜在靶点进行蛋白相互作用(protein-protein interaction,PPI)、基因本体论(gene ontology,GO)富集、京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析.采用分子对接验证有效成分与潜在靶点之间的结合.选择人乳头状甲状腺癌TPC1细胞株作为实验细胞,采用细胞增殖检测试剂盒(cell counting kit,CCK)-8评价有效成分对TPC1细胞的增殖抑制作用,流式细胞仪检测有效成分对细胞周期、凋亡的影响.采用GraphPad Prism 8.0软件进行数据统计分析并绘图,统计学方法采用单因素方差分析和t检验.结果 从夏枯草中筛选出11个抗儿童甲状腺癌的候选药效成分,对应166个潜在靶点.PPI、GO、KEGG分析预测夏枯草有效成分槲皮素、木犀草素、山柰酚可能通过抑制蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)信号通路发挥作用.分子对接显示,AKT(PDB ID:4GV1)与槲皮素、木犀草素、山柰酚的结合能分别为-7.35、-7.17、-7.32 kcal/mol,存在较强的结合作用,能够形成稳定的复合物.CCK-8实验结果显示,这3种候选成分中槲皮素对TPC1细胞的抑制作用最强,其48 h的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)值为(19.4±4.8)μmol/L,而木犀草素IC50值为(64.8±7.7)μmol/L,山柰酚IC50值＞100μmol/L.不同浓度槲皮素给药处理后,处于G2/M期的细胞比率从对照组的(12.88±1.33)％升至50μmol/L给药组的(18.97±1.50)％(P＜0.01),凋亡细胞的比率从对照组的(10.34±1.76)％升至50μmol/L给药组的(30.77±4.52)％(P＜0.001),呈剂量依赖性,差异具有统计学意义.结论 夏枯草有效成分槲皮素能诱导甲状腺癌TPC1细胞发生G2/M周期阻滞和凋亡,这种作用可能是通过抑制AKT信号通路实现的.

网络药理;夏枯草;周期阻滞;凋亡;蛋白激酶B;儿童甲状腺癌

陈蕾;卢泽容;黄雨晴;雷雨禾

广州中医药大学深圳医院(福田)药学部,广东 深圳 518034;暨南大学中医学院 方证研究中心,广东 广州510632

发育医学电子杂志

[1]陈蕾;卢泽容;黄雨晴;雷雨禾-.夏枯草有效成分对儿童甲状腺癌的抑制作用研究)[J].发育医学电子杂志,2022(04):241-249

TPC1,4GV1

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