典型文献
紫芝倍半萜合酶GsSTPS2可溶性表达条件的探索
文献摘要：
[目的]探索可溶性较差蛋白紫芝倍半萜合酶GsSTPS2的表达方法.[方法]更换不同的表达载体和表达菌株,通过对不同菌体密度、温度、时间、IPTG浓度的筛选优化GsSTPS2的诱导表达条件,在此基础上采用顶空固相微萃取法(HS-SPME)与气质联用技术(GC-MS)相结合分析重组大肠杆菌细胞培养液中的挥发性成分,鉴定GsSTPS2在大肠杆菌体内的催化活性.[结果]在初始菌液OD600为0.8,诱导温度为18℃,诱导时间为12 h,IPTG终浓度为1 mmol/L的培养条件下重组蛋白pET32a-GsSTPS2在Rosetta(DE3)中的可溶性表达量最高,达到28.07％.GsSTPS2可催化生成倍半萜碳氢化合物δ-杜松烯、杜松-3,5-二烯、β-杜松烯和顺-衣兰油-4(15),5-二烯及倍半萜含氧衍生物异香叶醇,荜澄茄油烯醇和τ-依兰油醇,其中异香叶醇作为GsSTPS2的主产物之一,具有杀白蚁、抗蠕虫和植物生长调节作用,有良好的应用价值和前景.[结论]本研究为可溶性较差或者易形成包涵体蛋白的表达提供了参考,为通过合成生物学方法生产异香叶醇奠定了基础.
文献关键词：
紫芝;倍半萜合酶;功能验证;HS-SPME-GC-MS分析
中图分类号：
作者姓名：
卫倩鹤;王齐;曹瑞;王丽芝;王海英
作者机构：
天津中医药大学,天津 301617
文献出处：
引用格式：
[1]卫倩鹤;王齐;曹瑞;王丽芝;王海英-.紫芝倍半萜合酶GsSTPS2可溶性表达条件的探索)[J].天津中医药大学学报,2022(06):780-788
A类：
GsSTPS2
B类：
紫芝,倍半萜合酶,可溶性表达,表达方法,表达载体,菌体密度,IPTG,筛选优化,诱导表达,顶空固相微萃取法,HS,SPME,气质联用技术,结合分析,大肠杆菌,细胞培养,培养液,挥发性成分,催化活性,菌液,OD600,诱导时间,培养条件,重组蛋白,pET32a,Rosetta,DE3,化生成,成倍,碳氢化合物,杜松,和顺,含氧,衍生物,异香,香叶醇,荜澄茄,烯醇,醇和,依兰,主产,白蚁,蠕虫,植物生长,生长调节,包涵体,合成生物学,功能验证
AB值：
0.366079
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