目的:观察荣筋拈痛方对膝骨关节炎模型大鼠的疗效,并基于lncRNA NEAT1与核因子NF-E2相关因子/抗氧化反应元件(Nrf 2/ARE)通路探讨该方延缓膝骨关节炎软骨退变的机制.方法:将45只SPF级2月龄SD大鼠适应性饲养1周后,按随机数字表法分为空白组和碘乙酸钠组,每组分别15只、30只;碘乙酸钠组大鼠于麻醉状态下,右侧膝关节腔注射20 mg/mL的碘乙酸钠0.05 mL,复制膝骨关节炎模型,空白组注射等量生理盐水.将造模后的碘乙酸钠组大鼠采用随机数字表法分为模型组和荣筋拈痛方组,每组15只.荣筋拈痛方组大鼠予1.9 g/(kg·d)荣筋拈痛方灌胃;空白组和模型组给予等量生理盐水灌服,3组均连续灌胃8周.干预结束后,麻醉下处死各组大鼠,分离与收集右膝关节软骨组织.采用HE染色法观察关节软骨组织病理改变;采用Western blot法检测软骨组织中Nrf 2、血红素加氧酶1(HO-1)、NAD(P)H醌氧化还原酶-1(NQO-1)、Kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白表达水平;采用实时PCR法检测软骨组织中lncRNA NEAT1表达水平.结果:①软骨组织病理改变情况:空白组软骨切线层完整,软骨基质着色浅红且均匀,移行层、辐射层、钙化层及其他层次结构完整且清晰;模型组切线层变薄,软骨膜表层发生破坏,软骨细胞簇集生长,移行层与辐射层软骨细胞分布无序,部分发生钙化,钙化层软骨细胞钙化明显,钙化层与软骨下骨间的黏合线起伏较大且不连续;荣筋拈痛方组的浅表层切线与关节面基本平行且完整,移行层、辐射层、钙化层及其他层次相对清晰可辨.②软骨组织Nrf 2/ARE通路相关蛋白表达:与空白组比较,模型组软骨组织Keap1、iNOS蛋白表达明显升高(P<0.05),Nrf 2、HO-1、NQO-1蛋白表达明显降低(P<0.05);与模型组比较,荣筋拈痛方组Keap1、iNOS蛋白表达明显降低(P<0.05),Nrf 2、HO-1、NQO-1蛋白表达明显升高(P<0.05).③软骨组织lncRNA NEAT1表达:与空白组比较,模型组lncRNA NEAT1表达水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,荣筋拈痛方组lncRNA NEAT1表达水平明显降低(P<0.05).结论:荣筋拈痛方可以延缓骨关节炎大鼠软骨退变,其作用机制可能与下调lncRNA NEAT1水平,上调Nrf 2信号及抗氧化信号分子表达,下调促氧化信号分子表达,抑制氧化应激水平有关.

膝骨关节炎;荣筋拈痛方;长链非编码RNA;氧化应激;软骨退变

付长龙;谢新宇;邱志伟;黄艳峰;金灵璐;李西海

福建中医药大学中西医结合研究院,福建福州350122;福建省中西医结合老年性疾病重点实验室,福建福州350122;福建中医药大学中西医结合学院,福建福州350122

康复学报

[1]付长龙;谢新宇;邱志伟;黄艳峰;金灵璐;李西海-.基于lncRNA NEAT1与Nrf2/ARE通路研究荣筋拈痛方延缓膝骨关节炎软骨退变作用机制)[J].康复学报,2022(04):332-337

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