[目的]优化6-生物素氨基己酸-七叶亭(6-biotinamidohexanoic acid-esculetin,Bio-AHA-ESC)制备工艺,并初步评价其生物学活性.[方法]以1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐[1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimide hydrochloride,EDCI]和N,N'-二环己基碳化二亚胺(N,N'-dicyclohexyl carbodiimide,DCC)为偶联催化剂,通过考察反应温度、时间、EDCI用量、4-二甲氨基吡啶(4-dimethylaminopyridine,DMAP)用量和七叶亭(esculetin,ESC)与6-生物素氨基己酸(6-biotinamidohexanoic acid,Bio-AHA)投料比,优化合成制备工艺;采用半制备液相色谱法对产物进行分离、纯化,并通过紫外光谱、高分辨质谱和核磁氢谱进行结构鉴定.最后对其氧化应激损伤保护作用和抗炎活性进行初步评价.[结果]EDCI是较为理想的催化剂,优化反应条件为:ESC与Bio-AHA摩尔比为2:1,DMAP添加量为EDCI摩尔数的十分之一,干燥N,N-二甲基甲酰胺(N,N-dimethylformamide,DMF)溶解,室温搅拌反应6 h.经鉴定产物为Bio-AHA-6-位羟基衍生化ESC,该产物在20.00～80.00μmol·L-1剂量范围内均可剂量依赖性抑制过氧化氢诱导的人肝癌细胞HepG2损伤和脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)分泌,尤其在80.00μmol·L-1时其与ESC生物学活性差异无统计学意义(P>0.05).[结论]本研究建立了一种温和、高效、专一,而且易于纯化的Bio-AHA-ESC制备方法,所得产物较好保持了ESC生物活性,为下一步深入探究中药活性单体ESC结合靶蛋白奠定了良好基础.

七叶亭;生物素化;化学合成;结构鉴定;抗氧化;抗炎

王佳茂;韦永华;卢易扬;李美芽;王林燕;应佳妮;蒋福升

浙江中医药大学生命科学学院 杭州 310053;浙江中医药大学第一临床医学院;浙江中医药大学中医药科学院

浙江中医药大学学报

[1]王佳茂;韦永华;卢易扬;李美芽;王林燕;应佳妮;蒋福升-.6-生物素氨基己酸-七叶亭合成及其生物活性评价)[J].浙江中医药大学学报,2022(07):708-715

biotinamidohexanoic,esculetin,dicyclohexyl,dimethylaminopyridine

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