典型文献
卵巢细胞系糖脂代谢紊乱模型的构建及机制探索
文献摘要：
目的 通过在培养基中加入葡萄糖及油酸,模拟糖脂代谢紊乱时体内高糖高油酸微环境,建立中国仓鼠卵巢(CHO)细胞代谢紊乱模型并探究作用机制.方法 培养卵巢细胞系CHO细胞,将细胞分为4组:对照组(C组)、单独高油酸模型组(O组)、单独高糖模型组(G组)、高糖高油酸联合模型组(GO组),采用25 mmol·L-1的葡萄糖与62.5μmol·L-1的油酸,分别诱导不同时长,选择最佳处理时间和药物处理方式,建立细胞模型,通过CCK-8检测细胞增殖水平,倒置显微镜观察模型细胞形态变化,Western blot、免疫荧光染色等方式检测半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达,通过磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(p-AMPK)以及磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)的蛋白表达,初步探索其机制.结果 HE染色可见,与C组相比,O组、G组和GO组细胞数量均减少(P均<0.05),且细胞形态由长梭形皱缩变圆;CCK-8结果显示,高糖高油酸联合处理24 h细胞增殖水平变化最明显,且与C组相比,O组、G组和GO组在24 h时细胞增殖率均下降(P均<0.05);对细胞蛋白进行Western blot实验,与C组相比,O组、G组和GO组CHO细胞Caspase-3蛋白表达增加,G组及GO组PCNA蛋白表达减少(P均<0.05).细胞免疫荧光染色结果亦显示,与C组相比,GO组细胞Caspase-3的表达增加(P<0.05),PCNA表达降低(P<0.05).与C组相比,O组、G组及GO组CHO细胞中p-AMPK蛋白表达减少,G组p-mTOR蛋白表达增加(P均<0.05).结论 给予CHO细胞高油酸、高糖和高糖高油酸联合处理均可以导致细胞处于代谢紊乱微环境,并用作研究糖脂代谢紊乱对CHO细胞作用的体外模型.
文献关键词：
糖脂代谢紊乱;CHO细胞微环境;细胞增殖;细胞凋亡
中图分类号：
作者姓名：
孙亚群;彭庆杰;王强强;苏亚珊;陈科明;李广永;吴际;何瑞
作者机构：
宁夏医科大学生育力保持教育部重点实验室,银川 750004;宁夏医科大学基础医学院,银川 750004;宁夏医科大学总医院泌尿外科,银川 750004
文献出处：
引用格式：
[1]孙亚群;彭庆杰;王强强;苏亚珊;陈科明;李广永;吴际;何瑞-.卵巢细胞系糖脂代谢紊乱模型的构建及机制探索)[J].宁夏医科大学学报,2022(06):609-615
A类：
B类：
细胞系,糖脂代谢紊乱,机制探索,时体,高糖,高油酸,仓鼠,CHO,细胞代谢,联合模型,处理时间,细胞模型,CCK,倒置,细胞形态,形态变化,blot,免疫荧光染色,天冬氨酸蛋白酶,Caspase,增殖细胞核抗原,PCNA,过磷酸,腺苷酸活化蛋白激酶,AMPK,磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白,mTOR,初步探索,HE,细胞数量,皱缩,变圆,联合处理,水平变化,细胞增殖率,细胞免疫,染色结果,体外模型,细胞微环境
AB值：
0.219688
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