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Cy5光学分子信标的制备及乳腺癌miRNA-21的检测研究
文献摘要:
目的 设计一种检测早期乳腺癌筛查肿瘤标志物microRNA-21(miRNA-21)的Cy5光学茎环DNA分子信标探针,构建引物堆叠的等温循环链置换荧光定量分析方法,实现对miRNA-21的高灵敏检测.方法 设计Cy5光学标记的茎环hairpinDNA(hDNA)探针,在靶标miRNA-21的配对引发下,激活等温循环链置换扩增反应,采用荧光定量分析方法,优化实验用量,对miRNA-21进行灵敏度、特异度检测,并与反转录荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测结果进行比较.结果 本研究设计的Cy5光学hDNA探针构建的等温循环链置换扩增反应,可对miRNA-21进行高灵敏度检测,其检测限可低至1 fmol/L;检测miRNA-21特异度良好,且不与其他miRNA反应产生荧光,能有效实现单碱基突变miRNA的区分;检测miRNA-21结果与金标准qRT-PCR检测结果的差异无统计学意义(P>0.05),证明本探针检测结果具有可信性.结论 本研究设计的Cy5光学探针检测miRNA-21的灵敏度和特异度高,可实现对早期乳腺癌患者的筛查及诊断.
文献关键词:
miRNA-21;乳腺癌;等温循环链置换反应;hDNA
中图分类号:
作者姓名:
植晓玲;李菁菁;顾纪生;戴家杰;孙春鸣;曹旭;赵欣玥;陈明慧
作者机构:
徐州医科大学医学影像学院,江苏 徐州 221004
文献出处:
引用格式:
[1]植晓玲;李菁菁;顾纪生;戴家杰;孙春鸣;曹旭;赵欣玥;陈明慧-.Cy5光学分子信标的制备及乳腺癌miRNA-21的检测研究)[J].徐州医科大学学报,2022(05):375-380
A类:
光学标记,hairpinDNA,hDNA,等温循环链置换反应
B类:
Cy5,分子信标,miRNA,早期乳腺癌,乳腺癌筛查,肿瘤标志物,microRNA,引物,堆叠,定量分析方法,高灵敏检测,靶标,发下,优化实验,qRT,高灵敏度检测,检测限,fmol,单碱基突变,金标准,可信性,光学探针,乳腺癌患者
AB值:
0.218648
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