典型文献
新型冠状病毒辅助蛋白ORF3a、ORF3b的致病机制研究
文献摘要：
目的 探讨新型冠状病毒(SARS-CoV-2)的非结构蛋白ORF3a、ORF3b在宿主细胞中的功能.方法 采用细胞免疫荧光法检测SARS-CoV-2假病毒颗粒的组装和释放量,采用实时荧光定量聚合酶链式反应和蛋白质印迹法(Western blot)检测ORF3a、ORF3b对β干扰素(IFN-β)和炎症因子表达的影响,采用Western blot检测ORF3a、ORF3b对干扰素信号通路中蛋白表达的影响.结果 荧光显微镜观察结果显示,经SARS-CoV-2假病毒感染的过表达血管紧张素转化酶2(ACE2)的A549细胞(A549-ACE2)中,转染ORF3a表达载体、ORF3b表达载体的A549-ACE2细胞组装和释放出的SARS-CoV-2假病毒颗粒量均高于未转染和空载转染的A549-ACE2细胞,差异有统计学意义(P＜0.001),说明ORF3a和ORF3b可促进SARS-CoV-2假病毒颗粒的组装和释放;给予ploy(I ∶ C)刺激并转染ORF3a或ORF3b表达载体的A549细胞,其IFN-β相对表达量低于单纯给予ploy(I ∶ C)刺激的A549细胞,差异有统计学意义(P＜0.001),说明ORF3a、ORF3b转染表达可显著抑制ploy(I ∶ C)诱导的IFN-β表达水平;Western blot检测结果显示,与单纯给予IFN-β处理相比,给予IFN-β联合ORF3a或ORF3b转染处理能够抑制干扰素信号通路中关键蛋白MyD88、TRAF6的表达水平;转染ORF3a、ORF3b表达载体的A549细胞中炎症因子(肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1β、白细胞介素-6)相对表达量均高于空载转染的A549细胞,差异有统计学意义(P＜0.01或P＜0.001).结论 非结构蛋白ORF3能够促进SARS-CoV-2组装和释放,诱导宿主炎症应答,并抑制宿主干扰素表达.
文献关键词：
新型冠状病毒;非结构蛋白;ORF3a;ORF3b;干扰素;炎症因子
中图分类号：
作者姓名：
高文欣;李希琳;傅煜轩
作者机构：
苏州大学生物医学研究院,江苏苏州,215000
文献出处：
引用格式：
[1]高文欣;李希琳;傅煜轩-.新型冠状病毒辅助蛋白ORF3a、ORF3b的致病机制研究)[J].实用临床医药杂志,2022(11):1-5
A类：
ORF3b,ploy
B类：
辅助蛋白,ORF3a,致病机制,SARS,CoV,非结构蛋白,宿主,主细胞,细胞免疫,免疫荧光法,假病毒,病毒颗,释放量,实时荧光定量聚合酶链式反应,蛋白质印迹法,blot,IFN,干扰素信号通路,荧光显微镜观察,过表达,血管紧张素转化酶,ACE2,A549,转染,表达载体,释放出,空载,相对表达量,制干,关键蛋白,MyD88,TRAF6,炎症应答
AB值：
0.166772
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