典型文献
凝胶中荧光颗粒原位电泳洗脱过量异硫氰酸荧光素用于图像分析
文献摘要：
去除荧光标记后残余荧光染料可以提高荧光颗粒检测的灵敏度、准确度和效率.该文发展了一种原位电泳洗脱(electrophoretic elution,EE)模型,用于在荧光标记后快速去除多余的荧光探针,实现荧光颗粒的灵敏检测.将牛血清蛋白(BSA)和磁珠(MBs)作为模式蛋白和微颗粒,混合孵育获得MBs-BSA,用异硫氰酸荧光素(FITC)对MBs-BSA标记,得到MBs-BSAFITC复合物.将含有多余FITC的MBs-BSAFITC溶液与低凝聚温度琼脂糖凝胶溶液按1:5的体积比混合,并将混合物凝胶和纯琼脂糖凝胶分段填充到电泳通道中.电泳过程中,利用颗粒尺寸与凝胶孔径的差异来保留MBs-BSAFITC,同时将游离的FITC洗脱.经过30 min的电泳洗脱,通道内多余的FITC清除率达到97.6％,同时目标颗粒荧光信号保留了27.8％.成像系统曝光时间为1.35 s时,电泳洗脱将颗粒与背景的荧光信号比(P/B ratio,PBr)从1.08增加到12.2.CCD相机的曝光时间增加到2.35 s,可以将PBr提高到15.5,可进一步实现对微弱荧光亮点的高灵敏检测.该模型有以下优点:(1)能对颗粒表面非特异性吸附的FITC实现有效洗脱,提高了检测的特异性;(2)能够将97％以上的游离FITC清除;(3)30 min内能够使凝胶内的背景荧光大幅降低,提高了PBr和检测灵敏度.因此,该方法具有在凝胶中进行基于磁珠/荧光颗粒点的免疫检测、在免疫电泳或凝胶电泳中对蛋白质/核酸条带进行荧光染色等领域的应用潜力.
文献关键词：
电泳;电洗脱;荧光颗粒;图像检测
中图分类号：
作者姓名：
陈国宏;郭泽华;曹毅仁;樊柳荫;刘伟文;马艺馨;曹成喜;张强
作者机构：
上海交通大学电子信息与电气工程学院,上海200240;上海交通大学学生创新中心,上海200240;上海交通大学附属上海第六人民医院,上海200240
文献出处：
引用格式：
[1]陈国宏;郭泽华;曹毅仁;樊柳荫;刘伟文;马艺馨;曹成喜;张强-.凝胶中荧光颗粒原位电泳洗脱过量异硫氰酸荧光素用于图像分析)[J].色谱,2022(07):610-615
A类：
BSAFITC,PBr,电洗脱
B类：
荧光颗粒,脱过,异硫氰酸荧光素,图像分析,荧光标记,荧光染料,文发,electrophoretic,elution,EE,多余,荧光探针,牛血清蛋白,磁珠,MBs,微颗粒,孵育,复合物,琼脂糖凝胶,胶溶,体积比,混合物,充到,颗粒尺寸,清除率,荧光信号,成像系统,曝光时间,ratio,CCD,微弱,光亮,高灵敏检测,非特异性吸附,内能,光大,检测灵敏度,免疫检测,免疫电泳,凝胶电泳,条带,带进,荧光染色,图像检测
AB值：
0.284708
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