典型文献
农杆菌介导的香榧幼胚遗传转化体系
文献摘要：
[目的]以香榧Torreya grandis?'Merrillii'幼胚为受体材料,开展农杆菌Agrobacterium tumefaciens介导的遗传转化研究,揭示影响香榧遗传转化的关键因素,以建立农杆菌介导的香榧幼胚遗传转化体系.[方法]以香榧种子突破种鳞后第8周至第11周的幼胚作为转基因受体材料,比较受体胚龄、农杆菌菌液浓度、侵染时间、抗生素质量浓度对遗传转化效率的影响,并采用潮霉素、绿色荧光蛋白GFP表达及GFP基因聚合酶链式反应对遗传转化香榧幼胚培养物进行阳性筛选.[结果]随着胚龄的增加,香榧幼胚抗逆性增强,污染率降低,成活率提高,第10周和第11周幼胚成活率分别为52.1％和52.3％.农杆菌菌液浓度和侵染时间均对香榧幼胚的污染率、成活率、愈伤组织诱导率以及体胚发生率具有显著影响(P<0.05).菌液吸光度[D(600)]为0.5时,香榧幼胚愈伤组织诱导率和体胚发生率最高,分别为17.9％和17.3％;侵染时间为10?min时,愈伤组织诱导率和体胚发生率为最高,分别达17.5％和17.1％.羧苄青霉素对于受体材料的农杆菌脱除具有显著影响(P<0.05),当羧苄青霉素质量浓度为300?mg·L?1时,成活率、愈伤组织诱导率和体胚发生率均最高,分别为60.5％、15.8％和17.5％.潮霉素对于香榧幼胚培养物的阳性筛选具有良好的效果,当潮霉素质量浓度为100?mg·L?1时,成活率为30.5％.[结论]不同胚龄香榧幼胚遗传转化效果不同,突破种鳞后第10周香榧幼胚遗传转化效果良好;当农杆菌菌液D(600)为0.5,侵染时间为10?min时,转化效果最佳;300?mg·L?1为羧苄青霉素脱除农杆菌的最佳质量浓度;100?mg·L?1是潮霉素阳性香榧幼胚筛选的最佳质量浓度.图3表5参37
文献关键词：
香榧;幼胚;农杆菌介导的遗传转化;羧苄青霉素;潮霉素
中图分类号：
作者姓名：
周佳君;胡恒康;龚丽;干安格;喻卫武;吴家胜;黄坚钦;张启香
作者机构：
浙江农林大学 林业与生物技术学院,浙江 杭州 311300;浙江农林大学 省部共建亚热带森林培育国家重点实验室,浙江 杭州 311300
文献出处：
引用格式：
[1]周佳君;胡恒康;龚丽;干安格;喻卫武;吴家胜;黄坚钦;张启香-.农杆菌介导的香榧幼胚遗传转化体系)[J].浙江农林大学学报,2022(01):13-21
A类：
B类：
香榧,幼胚,遗传转化体系,Torreya,grandis,Merrillii,受体材料,Agrobacterium,tumefaciens,转化研究,种鳞,周至,转基因,菌液浓度,侵染,遗传转化效率,潮霉素,绿色荧光蛋白,GFP,基因聚合,聚合酶链式反应,化香,抗逆性,污染率,成活率,愈伤组织诱导率,体胚发生,吸光度,羧苄青霉素,脱除,同胚,转化效果,农杆菌介导的遗传转化
AB值：
0.198814
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