典型文献
农杆菌介导的山苍子遗传转化体系的构建
文献摘要：
[目的]筛选适合山苍子愈伤组织分化的激素比例,研究其对抗生素的耐受性,构建山苍子遗传转化体系.[方法]以山苍子无菌苗茎段诱导的愈伤组织为试验材料,研究不同激素浓度配比对山苍子愈伤组织诱导不定芽及不定芽生根的影响,探讨愈伤组织对潮霉素和头孢霉素的临界筛选浓度,并通过农杆菌介导法将外源基因导入山苍子愈伤组织中.[结果]筛选出诱导愈伤组织不定芽分化培养基为:MS+2.0 mg·L-1 6-BA+0.01 mg·L-1 IBA+0.05 mg·L-1 TDZ,分化率为 16.67％～36.67％;不定芽生根培养基为 1/2MS+0.5 mg·L-1 IAA,生根率为97.33％.遗传转化初期筛选抗性愈伤组织的潮霉素浓度为5 mg·L-1(约7～10 d),通过逐步增加潮霉素浓度至30 mg·L1进行筛选培养,头孢霉素最适浓度为300 mg·L-1.采用农杆菌介导法将外源基因转入愈伤组织中,并设计PCR引物进行鉴定,共检测16株抗性苗均含有目的条带,表明目的基因已插入山苍子基因组中,转化率为0.67％.通过Southern检测表明,目的片段已插入山苍子愈伤组织中.[结论]初步建立山苍子再生及遗传转化体系,且已获得多个基因的抗性愈伤组织,为进一步开展基因功能研究及遗传改良提供技术支持.
文献关键词：
山苍子;再生;抗生素;遗传转化;农杆菌介导法
中图分类号：
作者姓名：
王民炎;俞文仙;赵耘霄;陈益存;高暝;吴立文;吴善群;汪阳东
作者机构：
中国林业科学研究院亚热带林业研究所,浙江杭州 311400;南京林业大学,江苏南京 210037;杭州市富阳区农业农村局,浙江杭州 311400;福建省大田县森林资源管理站,福建大田 366100
文献出处：
引用格式：
[1]王民炎;俞文仙;赵耘霄;陈益存;高暝;吴立文;吴善群;汪阳东-.农杆菌介导的山苍子遗传转化体系的构建)[J].林业科学研究,2022(05):71-80
A类：
B类：
山苍子,遗传转化体系,合山,组织分化,耐受性,无菌苗,茎段,激素浓度,愈伤组织诱导,潮霉素,头孢,农杆菌介导法,外源基因,不定芽分化,分化培养,MS+2,IBA+0,TDZ,分化率,生根培养基,2MS+0,IAA,生根率,L1,最适浓度,转入,引物,条带,明目,目的基因,Southern,基因功能,功能研究,遗传改良
AB值：
0.262665
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