典型文献
牦牛乳腺上皮细胞的体外分离培养及鉴定
文献摘要：
为提高牦牛乳腺上皮细胞体外培养成功率,实现高度可重复性,试验采用2.5 g/L(含0.5 g/L EDTA)胰酶和Ⅰ型胶原酶(1 mg/mL)分段消化牦牛乳腺组织块以分离细胞,原代培养时于DMEM/F12培养体系内添加氢化可的松(1 μg/mL)、表皮生长因子(50 ng/mL)及胰岛素-转铁蛋白-硒(5 μg/mL),传代时用牦牛乳腺上皮细胞与成纤维细胞对胰酶敏感度及贴壁时间的差异特性进行纯化.采用CCK8法测定细胞生长曲线,细胞免疫荧光技术鉴定细胞分子表型,Western blot技术对细胞进行功能鉴定.结果显示,组合酶分段消化法可获得较多细胞量,激素添加有利于促进细胞贴壁及增殖,分离纯化后的细胞具有正常生长特性,经分子表型及功能鉴定纯化后的细胞可阳性表达角蛋白18及β-酪蛋白,阴性表达角蛋白14及波形蛋白,上述3种激素存在时,细胞可在蛋白质水平表达μ-酪蛋白,催乳素可促进其表达,说明成功培养了具有泌乳功能的牦牛乳腺上皮细胞,建立了有效的牦牛乳腺上皮细胞体外培养技术体系,可为以后的相关研究提供参考.
文献关键词：
牦牛;乳腺上皮细胞;体外培养;纯化;生长曲线
中图分类号：
作者姓名：
杨玉莹;荆海霞;董宝霞;张勤文
作者机构：
青海大学农牧学院动物医学系,青海西宁810016
文献出处：
引用格式：
[1]杨玉莹;荆海霞;董宝霞;张勤文-.牦牛乳腺上皮细胞的体外分离培养及鉴定)[J].动物医学进展,2022(02):64-69
A类：
B类：
牦牛乳腺上皮细胞,外分,分离培养,细胞体,可重复性,EDTA,胰酶,胶原酶,乳腺组织,原代培养,DMEM,F12,加氢,氢化可的松,表皮生长因子,转铁蛋白,传代,代时,成纤维细胞,贴壁,CCK8,细胞生长,生长曲线,细胞免疫,免疫荧光技术,技术鉴定,分子表型,blot,功能鉴定,消化法,多细胞,分离纯化,生长特性,阳性表达,角蛋白,酪蛋白,波形蛋白,蛋白质水平,催乳素,泌乳功能,体外培养技术
AB值：
0.268136
相似文献
机标中图分类号，由域田数据科技根据网络公开资料自动分析生成，仅供学习研究参考。
