典型文献
不结球白菜耐热相关基因BcNAC036的克隆、亚细胞定位及功能分析
文献摘要：
[目的]本文旨在研究不结球白菜基因BcNAC036的亚细胞定位及高温胁迫下的表达分析,并探索其功能及调控机制.[方法]以不结球白菜'苏州青'为试验材料,提取叶片总RNA并且反转录成cDNA,同源克隆BcNAC036的全长基因序列,运用在线软件工具对其进行生物信息学分析.采用同源重组的方法构建过表达载体pCAMBIA1302-BcNAC036-GFP,农杆菌介导法将构建的过表达载体注射入本氏烟草叶片背面,通过激光共聚焦显微镜观察其亚细胞表达部位.采用RT-qPCR技术检测高温处理下不结球白菜耐高温品种'苏州青'和热敏感品种'矮脚黄'以及转基因拟南芥体内BcNAC036基因的表达量.对转基因拟南芥进行高温处理并统计其成活率.[结果]同源克隆的方法获得BcNAC036基因,其开放阅读框(ORF)为840 bp,编码279个氨基酸,相对分子质量为32154.83,等电点是8.96.氨基酸序列比对以及同源进化树分析结果显示,BcNAC036蛋白与芜菁、甘蓝型油菜NAC036蛋白同源关系较近.亚细胞定位结果显示,BcNAC036的亚细胞定位表达在细胞核.RT-qPCR表明,BcNAC036在耐高温和热敏感品种中表达差异较大且表达量均呈明显下降趋势.转基因拟南芥与野生型相比,其成活率较低.[结论]BcNAC036蛋白在细胞核表达,BcNAC036基因与不结球白菜耐高温性呈负相关.
文献关键词：
不结球白菜;BcNAC036基因;亚细胞定位;耐高温;过表达植株
中图分类号：
作者姓名：
刘路平;刘高峰;蒋程;侯喜林
作者机构：
南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室/农业农村部华东地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室/园艺作物种质创新与利用教育部工程研究中心/南京苏曼等离子工程研究院,江苏 南京210095
文献出处：
引用格式：
[1]刘路平;刘高峰;蒋程;侯喜林-.不结球白菜耐热相关基因BcNAC036的克隆、亚细胞定位及功能分析)[J].南京农业大学学报,2022(04):647-655
A类：
BcNAC036,NAC036
B类：
不结球白菜,耐热,亚细胞定位,功能分析,高温胁迫,表达分析,调控机制,苏州青,录成,cDNA,同源克隆,全长,基因序列,软件工具,生物信息学分析,同源重组,过表达载体,pCAMBIA1302,GFP,农杆菌介导法,射入,本氏烟草,草叶,背面,激光共聚焦显微镜,qPCR,测高,高温处理,高温品种,热敏感,敏感品种,矮脚黄,转基因拟南芥,成活率,开放阅读框,ORF,bp,相对分子质量,等电点,氨基酸序列比对,进化树分析,芜菁,甘蓝型油菜,定位结果,细胞核,表达差异,野生型,耐高温性,过表达植株
AB值：
0.268403
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