典型文献
携带OX40L重组溶瘤病毒的构建及靶向杀伤肝癌的研究
文献摘要:
目的 拯救携带OX40L的重组溶瘤流感病毒株,全面鉴定并评价其靶向杀伤肝癌细胞的效果.方法 将编码OX40L的基因片段嵌合在A/PuertoRico/8/34(PR8)的NS片段特定位置,利用反向遗传学技术(reverse genetics,RG),与PR8流感病毒的剩余 7 个骨 架质粒 pHW191-PB2、pHW192-PB1、pHW193-PA、pHW194-HA、pHW195-NP、pHW196-NA、pHW197-M共转染COSI/MDCK细胞,成功拯救获得重组溶瘤流感病毒,命名为rFlu-OX40L.经血凝、TCID50方法测定病毒滴度;重组病毒纯化后电镜观察病毒形态特征及大小分布;检测MDCK细胞病毒生长曲线;MTS法检测重组病毒对肝癌细胞活力的影响;流式细胞术检测重组病毒诱导肝癌细胞死亡方式;利用肝癌荷瘤小鼠模型评价重组病毒rFlu-OX40L在动物体内的抗肿瘤效果.结果 重组溶瘤流感病毒rFlu-OX40L可在鸡胚中稳定传代,HA效价达27~8,病毒滴度可达7~8LgTCID50/ml;重组病毒rFlu-OX40L与流感病毒PR8生长曲线相一致,72 h达高峰;MTS结果显示,3 MOI重组病毒可显著降低肝癌细胞活力,且对正常肝细胞无明显影响,呈时间和剂量依赖性;流式细胞结果显示,重组病毒可显著诱导肝癌细胞凋亡,呈时间和剂量依赖性;利用肝癌荷瘤小鼠模型,瘤内注射重组溶瘤流感病毒rFlu-OX40L较PR8、PBS对照组,小鼠脾细胞中CD3+、CD4+、CD8+、CD45+、CD69+T细胞数量呈现显著升高趋势.结论 携带OX40L的重组溶瘤流感病毒rFlu-OX40L在体内外均可选择性杀伤肝癌细胞,有望为肝癌的临床治疗提供新的免疫治疗策略.
文献关键词:
溶瘤病毒;流感病毒;RG技术;OX40L;肝癌
中图分类号:
作者姓名:
杨豪;邓卓雅;孙芳;雷光林;程晋霞;于洪妤;田崇瑜;张绍庚;杨鹏辉
作者机构:
中国人民解放军总医院第五医学中心,北京100039;河北北方学院,张家口 075000
文献出处:
引用格式:
[1]杨豪;邓卓雅;孙芳;雷光林;程晋霞;于洪妤;田崇瑜;张绍庚;杨鹏辉-.携带OX40L重组溶瘤病毒的构建及靶向杀伤肝癌的研究)[J].生物化学与生物物理进展,2022(12):2387-2397
A类:
PuertoRico,pHW191,pHW192,pHW193,pHW194,pHW195,pHW196,pHW197,rFlu,8LgTCID50,CD69+T
B类:
OX40L,溶瘤病毒,杀伤,拯救,流感病毒,毒株,嵌合,PR8,NS,特定位置,反向遗传学,遗传学技术,reverse,genetics,RG,质粒,PB2,PB1,PA,HA,NP,NA,共转染,COSI,MDCK,经血,血凝,病毒滴度,重组病毒,电镜观察,生长曲线,MTS,细胞活力,流式细胞术,病毒诱导,细胞死亡方式,荷瘤小鼠,小鼠模型,模型评价,动物体,抗肿瘤效果,鸡胚,传代,效价,ml,相一致,MOI,肝细胞,剂量依赖,量依赖性,肝癌细胞凋亡,瘤内注射,PBS,脾细胞,CD3+,CD4+,CD8+,CD45+,细胞数量,体内外,可选择性,免疫治疗,治疗策略
AB值:
0.291586
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