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RAB25沉默抑制结直肠癌细胞铁死亡的作用研究
文献摘要：
目的:探讨沉默RAS相关结合蛋白25(ras-associated binding protein 25,RAB25)在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)细胞铁死亡中的作用.方法:利用GEPIA(Gene Expression Profiling Interactive Analysis)数据库分析RAB25的表达水平及与铁死亡关键基因表达之间的关联.在CRC细胞系HCT116上构建慢病毒介导的RAB25沉默细胞株(shRAB25),应用定量实时聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)和蛋白印迹法检测RAB25的表达情况.应用细胞增殖与毒性检测法(CCK8)检测不同浓度的(0～20μmol/L)铁死亡诱导剂erastin对沉默RAB25后细胞活力的影响;利用荧光显微镜和透射电镜分别观察erastin对沉默RAB25后的细胞形态和线粒体结构的影响;使用C11-BODIPY染色和流式细胞仪检测erastin对沉默RAB25后的细胞脂膜过氧化水平的影响.检测erastin与西妥昔单抗对沉默RAB25后的细胞活力的联合作用.结果:RAB25在CRC中表达升高(P<0.01);RAB25表达与铁死亡关键基因表达明显相关.当erastin≥10μmol/L时,与阴性对照组(空载慢病毒感染阴性组)相比,RAB25沉默组抑制了铁死亡导致的细胞杀伤(P<0.0001),细胞形态和线粒体结构更清晰完整;流式细胞术检测结果提示,细胞脂膜过氧化水平明显下降(P<0.0001).RAB25表达使erastin和西妥昔单抗对HCT116细胞的联合杀伤作用明显增强.结论:沉默RAB25可抑制erastin诱导的CRC细胞铁死亡;RAB25可协同铁死亡诱导剂erastin诱导铁死亡,增强西妥昔单抗的疗效.
文献关键词：
结直肠癌;RAS相关结合蛋白25;铁死亡
中图分类号：
作者姓名：
李佳曦;汪锦江;俞立萍;袁英;乔光磊;马俐君
作者机构：
上海交通大学医学院附属同仁医院肿瘤科,上海 200336
文献出处：
引用格式：
[1]李佳曦;汪锦江;俞立萍;袁英;乔光磊;马俐君-.RAB25沉默抑制结直肠癌细胞铁死亡的作用研究)[J].诊断学理论与实践,2022(06):710-718
A类：
RAB25,shRAB25
B类：
结直肠癌细胞,细胞铁死亡,RAS,结合蛋白,associated,binding,protein,colorectal,cancer,CRC,GEPIA,Gene,Expression,Profiling,Interactive,Analysis,数据库分析,关键基因表达,细胞系,HCT116,细胞株,实时聚合酶链反应,quantitative,real,polymerase,chain,reaction,qRT,蛋白印迹法,毒性检测,检测法,CCK8,铁死亡诱导剂,erastin,细胞活力,荧光显微镜,透射电镜,别观,细胞形态,线粒体结构,C11,BODIPY,流式细胞仪,氧化水平,西妥昔单抗,联合作用,空载,慢病毒感染,流式细胞术,杀伤作用,明显增强,可抑制
AB值：
0.265616
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