典型文献
同种属来源一抗在乳腺癌量子点多标记荧光染色中的应用
文献摘要:
目的:利用多色量子点(QDs)对细胞角蛋白(CK)、雌激素受体(ER)和人类表皮生长因子受体2(HER-2)进行间接法荧光染色,探讨同种属来源一抗多标记QDs染色的可行性和应用效果.方法:利用EliVision二步法对28例浸润性乳腺癌组织中CK、HER-2和ER进行免疫组化染色,利用QDs-565、QDs-655和QDs-605对28例浸润性乳腺癌组织中CK、HER-2和ER进行间接法单标记荧光染色和三标记荧光染色,使用装备有CRi Nuance多光谱成像系统的Olympus BX51荧光显微镜采集荧光光谱信息,并从采集的荧光图像中选取单个乳腺癌细胞进行亚细胞定位分析.结果:对于单个靶标而言,免疫组化染色和QDs荧光染色都能较清楚地显示靶标的亚细胞定位和表达情况.三标记荧光染色结果显示,绿色QDs-565标记了主要表达于肿瘤细胞质的CK,呈现出癌巢的轮廓,红色QDs-655和品红色QDs-605分别标记了表达于肿瘤细胞膜的HER-2和细胞核的ER,两种同种属来源的一抗HER-2和ER未发生明显的交叉反应.对三种靶标的亚细胞定位分析显示,胞核中ER的品红色荧光信号与胞膜上HER-2的红色荧光信号和胞质中CK的绿色荧光信号在空间上分离清楚,未发生明显光谱重叠现象.结论:基于多色QDs的间接法多标记荧光染色,通过调整抗体浓度、优化孵育时间、彻底清洗等手段,可较好地避免一抗种属来源相同时的交叉反应,与CRi Nuance多光谱成像系统进行结合,有利于对各个靶标分子进行分离和亚细胞定位,实现更准确的光谱定量分析.
文献关键词:
乳腺癌;多标荧光染色;量子点;HER-2;ER
中图分类号:
作者姓名:
徐千;陈媛媛;王林伟;熊斌
作者机构:
肿瘤生物学行为湖北省重点实验室/湖北省肿瘤医学临床研究中心 湖北 武汉 430071;武汉大学中南医院胃肠外科 湖北 武汉 430071;武汉大学中南医院肿瘤放化疗科 湖北 武汉 430071
文献出处:
引用格式:
[1]徐千;陈媛媛;王林伟;熊斌-.同种属来源一抗在乳腺癌量子点多标记荧光染色中的应用)[J].武汉大学学报(医学版),2022(05):727-733
A类:
Nuance,BX51,多标荧光染色
B类:
种属,量子点,多标记,多色,QDs,细胞角蛋白,雌激素受体,人类表皮生长因子受体,HER,行间,间接法,EliVision,二步法,浸润性乳腺癌,癌组织,免疫组化染色,备有,CRi,多光谱成像,光谱成像系统,Olympus,荧光显微镜,荧光光谱,光谱信息,荧光图像,乳腺癌细胞,亚细胞定位,定位分析,靶标,楚地,染色结果,肿瘤细胞,细胞质,品红色,细胞膜,细胞核,交叉反应,红色荧光,荧光信号,光谱重叠,抗体浓度,孵育时间
AB值:
0.22974
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