典型文献
钩端螺旋体56606v对小鼠中性粒细胞凋亡的影响
文献摘要:
目的 ·探究钩端螺旋体56606v对小鼠中性粒细胞凋亡的影响及相关作用机制.方法 ·用钩端螺旋体56606v在感染复数(multiplicity of infection,MOI)分别为100、300、500时感染小鼠中性粒细胞0.5、6、12、24 h;以未被感染的中性粒细胞为对照.将含有4μmol/L星形孢菌素(Staurosporine,STS)的等量细胞培养基处理的细胞作为凋亡阳性对照.采用流式细胞术检测细胞的凋亡情况;采用Western blotting技术检测钩端螺旋体56606v感染小鼠中性粒细胞后caspase-3的切割情况和核因子κB(NF-κB)通路的激活情况,并验证NF-κB抑制剂BAY 11-7082对NF-κB通路的抑制作用;通过添加NF-κB抑制剂BAY 11-7082,进一步检测NF-κB通路在钩端螺旋体56606v导致的中性粒细胞凋亡抑制中是否发挥作用;将巨噬细胞与钩端螺旋体56606v感染或未感染的中性粒细胞共孵育,通过流式细胞术检测巨噬细胞对中性粒细胞的吞噬情况.结果 ·流式细胞术检测结果显示,钩端螺旋体感染组与未感染对照组相比,小鼠中性粒细胞凋亡率降低;随MOI的增大,钩端螺旋体对中性粒细胞的凋亡抑制作用增强;不同MOI条件下,2组凋亡率的差异均有统计学意义(均P=0.000).MOI=100的钩端螺旋体感染中性粒细胞0.5、6和12 h时,其凋亡率均较相应的未感染对照组降低(均P<0.05);而使用促凋亡剂STS处理后,则增强了小鼠中性粒细胞的凋亡程度.Western blotting结果显示caspase-3的切割在钩端螺旋体56606v感染后明显减少,NF-κB磷酸化水平在感染后显著上升,添加NF-κB抑制剂BAY 11-7082能够显著抑制感染后和未感染条件下NF-κB通路的激活.在钩端螺旋体56606v感染或未感染条件下,添加NF-κB抑制剂BAY11-7082均显著提高了小鼠中性粒细胞凋亡率(均P=0.000).钩端螺旋体56606v感染的中性粒细胞与未感染对照组相比,被巨噬细胞吞噬的比例显著降低(P=0.027).结论 ·钩端螺旋体56606v通过激活NF-κB通路,抑制小鼠中性粒细胞的凋亡,进一步降低巨噬细胞对中性粒细胞的胞葬作用.
文献关键词:
钩端螺旋体;中性粒细胞;细胞凋亡;核因子κB
中图分类号:
作者姓名:
杜琳;何平
作者机构:
上海交通大学医学院免疫学与微生物学系,上海 200025
文献出处:
引用格式:
[1]杜琳;何平-.钩端螺旋体56606v对小鼠中性粒细胞凋亡的影响)[J].上海交通大学学报(医学版),2022(11):1517-1523
A类:
56606v,Staurosporine
B类:
钩端螺旋体,粒细胞凋亡,复数,multiplicity,infection,MOI,星形,菌素,STS,等量,细胞培养,阳性对照,流式细胞术,blotting,caspase,核因子,巨噬细胞,未感染,孵育,过流,对中性,细胞凋亡率,促凋亡,磷酸化,BAY11,细胞吞噬,胞葬作用
AB值:
0.125625
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