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密码子优化的人溶菌酶基因在毕赤酵母中的分泌表达及抗菌活性分析
文献摘要：
人溶菌酶(human lysozyme,hLYZ)是一种天然活性蛋白质,具有抗菌性,目前主要应用于食品添加剂、动物饲料、药物治疗领域.根据毕赤酵母表达偏爱密码子特点,通过优化hlyz基因密码子,人工合成目的基因,构建了分泌表达载体pPIC9K-hlyz.通过电击转化法将pPIC9K-hly质粒重组至毕赤酵母GS115染色体中,经筛选得到重组毕赤酵母GS115-pPIC9K-hlyz.在28℃、pH 6.0、转速240 r·min-1、1％甲醇诱导下表达120 h,发酵液上清酶活达到最高,为(2414.9±108.1)U·mL-1,蛋白浓度为166.7μg·mL-1.发酵液上清经过Sephadex G50纯化,获得较纯的hLYZ,经SDS-PAGE分析,在近14.7 kDa处显示单一条带.抗菌实验结果表明,重组hLYZ对革兰氏阳性菌的抗菌效果大于革兰氏阴性菌;重组hLYZ的抗菌效果是hLYZ标准品的10～20倍.
文献关键词：
人溶菌酶;毕赤酵母;密码子优化;抗菌谱
中图分类号：
作者姓名：
徐艳艳;廖志银;王珍;王首锋
作者机构：
浙江大学 基础医学系,浙江 杭州 310058;绿城农科检测技术有限公司,浙江 杭州 310052;浙江省微生物生化与代谢工程省级重点实验室,浙江 杭州 310058
文献出处：
引用格式：
[1]徐艳艳;廖志银;王珍;王首锋-.密码子优化的人溶菌酶基因在毕赤酵母中的分泌表达及抗菌活性分析)[J].浙江大学学报（理学版）,2022(06):753-759
A类：
hLYZ,hlyz
B类：
密码子优化,人溶菌酶,酶基因,毕赤酵母,分泌表达,抗菌活性,活性分析,human,lysozyme,种天然,活性蛋白,抗菌性,主要应用,食品添加剂,动物饲料,酵母表达,偏爱,人工合成,目的基因,表达载体,pPIC9K,电击转化,转化法,质粒,粒重,GS115,选得,甲醇诱导,发酵液,蛋白浓度,上清经,Sephadex,G50,SDS,PAGE,kDa,条带,革兰氏阳性菌,抗菌效果,革兰氏阴性菌,标准品,抗菌谱
AB值：
0.365847
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