典型文献
拟南芥LecRK Ⅳ.3胞内激酶域的原核表达、纯化及鉴定
文献摘要：
类受体激酶在植物的生长发育、抵御生物以及非生物胁迫等过程中发挥着重要作用,被认为是植物中重要的跨膜信号分子.凝集素样类受体激酶(lectin-receptor like kinases,LecRKs)属于类受体激酶中的第二大亚家族,但是目前在植物领域中研究较少.笔者近期的研究结果表明,LecRK Ⅳ.3在植物应答盐胁迫、紫外线胁迫响应中发挥着重要作用.类受体激酶胞内域(intracellular domain,ID)的激酶活性对LecRK Ⅳ.3的功能至关重要,为了阐明LecRK Ⅳ.3是否具有激酶活性,首先克隆了 LecRK Ⅳ.3ID,通过一步重组法构建至pET30a载体上,获得His-LecRK Ⅳ.3ID原核表达载体并转化至5种不同大肠杆菌表达宿主菌株中.以不同宿主菌生长情况来探索His-LecRK Ⅳ.3ID蛋白的最佳表达宿主,最终得到表达该蛋白的最佳宿主为OverExpress C43(DE3).此宿主获得的融合蛋白主要分布在上清液;Western blot免疫印迹技术证明该蛋白能被Anti-His-HRP抗体识别;放射性同位素法检测到其具有激酶活性.该结果不仅为研究LecRK Ⅳ.3的生物学功能奠定了基础,也为将来纯化其他蛋白激酶提供理论参考.
文献关键词：
凝集素样类受体激酶;原核表达宿主;激酶活性;同位素;拟南芥
中图分类号：
作者姓名：
赵记龙;许大金;任旭萌;张胜伟
作者机构：
河北师范大学生命科学学院分子细胞生物学教育部重点实验室,河北石家庄 050024
文献出处：
引用格式：
[1]赵记龙;许大金;任旭萌;张胜伟-.拟南芥LecRK Ⅳ.3胞内激酶域的原核表达、纯化及鉴定)[J].河北师范大学学报（自然科学版）,2022(05):520-526
A类：
LecRK,凝集素样类受体激酶,LecRKs,3ID,OverExpress,原核表达宿主
B类：
拟南芥,激酶域,非生物胁迫,信号分子,lectin,receptor,like,kinases,亚家族,中研,盐胁迫,紫外线,胁迫响应,内域,intracellular,domain,激酶活性,pET30a,His,原核表达载体,同大,大肠杆菌表达,宿主菌,不同宿主,生长情况,C43,DE3,融合蛋白,上清液,blot,免疫印迹,印迹技术,技术证明,Anti,HRP,放射性同位素,生物学功能,蛋白激酶
AB值：
0.27281
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