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犬瘟热病毒核衣壳蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
文献摘要：
为了制备犬瘟热病毒(CDV)核衣壳蛋白(NP)的单克隆抗体,从而为建立CDV的诊断方法提供有效试剂.将纯化后的CDV核蛋白作为免疫原注射至BALB/c小鼠腹腔中,取经4次长程免疫和1次加强免疫并达到融合标准的小鼠脾脏刮制成悬液,与小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)进行融合制备杂交瘤细胞,利用间接ELISA筛选,并对单抗进行生物特性鉴定.结果表明:经过筛选后共获得2株可持续分泌抗CDV NP的单克隆细胞株,以3-3 G、1-10 B命名.2株细胞株抗体经效价测定均可达到1:2048000;经亚型鉴定,2株杂交瘤细胞均为IgG2型;经过protein A柱纯化,抗体纯度达到了90％以上;BCA法测得抗体浓度至少达2.78 mg/mL;通过Western blot鉴定,制备所得CDV NP单克隆抗体与纯化的CDV NP抗原在预期的60 kd处有蛋白免疫印迹条带.该研究制备的单克隆抗体为后续犬瘟热的检测方法的研究奠定了基础.
文献关键词：
犬瘟热病毒;核衣壳蛋白;单克隆抗体;细胞融合;效价测定
中图分类号：
作者姓名：
冉皑;凌洪权;曾政;骆璐;吴胜昔;董春霞;李云;陈娅
作者机构：
重庆理工大学 药学与生物工程学院, 重庆 400054;重庆市动物疫病预防控制中心, 重庆 401120
文献出处：
引用格式：
[1]冉皑;凌洪权;曾政;骆璐;吴胜昔;董春霞;李云;陈娅-.犬瘟热病毒核衣壳蛋白单克隆抗体的制备与鉴定)[J].重庆理工大学学报,2022(10):305-310
A类：
B类：
犬瘟热病毒,核衣壳蛋白,单克隆抗体的制备,CDV,NP,核蛋白,免疫原,原注,BALB,小鼠腹腔,取经,次长,长程,加强免疫,融合标准,脾脏,骨髓瘤细胞,SP2,杂交瘤细胞,单抗,生物特性,过筛,共获,单克隆细胞,细胞株,效价测定,IgG2,protein,BCA,抗体浓度,blot,kd,蛋白免疫印迹,条带,细胞融合
AB值：
0.310302
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