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典型文献
一种新型糖苷水解酶的异源表达及酶学性质研究
文献摘要:
为得到MtGH6最优的表达宿主,构建了质粒pET21a–MtGH6、pBES–MtGH6、pPICZαA–MtGH6,以大肠埃希菌BL21、枯草芽孢杆菌RIK1285及毕赤酵母GS115为工程菌,对MtGH6进行异源表达及分离纯化,并对表达MtGH6的3个宿主菌的生长状况、产酶量、纯化回收率、酶活力等参数进行比较分析.结果表明:大肠埃希菌BL21及枯草芽孢杆菌RIK1285在生长稳定后,OD值维持在1.5,而毕赤酵母GS115生长稳定后,OD值维持在2.0;毕赤酵母GS115生产的MtGH6为77 mg/L,纯化回收率为15.40%,产酶量和纯化回收率均高于大肠埃希菌BL21、枯草芽孢杆菌RIK1285生产的MtGH6;由毕赤酵母GS115表达的MtGH6的酶活力为15.60 U/mg,由大肠埃希菌BL21及枯草芽孢杆菌RIK1285表达的MtGH6分别为7.45、10.06 U/mg,说明毕赤酵母GS115是MtGH6的最优表达宿主;对其分泌的MtGH6的酶学性质展开研究,结果表明在降解微晶纤维素的反应中,该酶最适pH为8.0,最适温度为60℃,添加0.5 mmol/L Mn2+可使其活性提高,表明MtGH6在生物燃料生产中可能具有良好的应用前景.
文献关键词:
糖苷水解酶;异源表达;宿主菌;酶学性质
作者姓名:
徐龙威;雍婕;周海燕
作者机构:
湖南农业大学生物科学技术学院,湖南长沙 410128
引用格式:
[1]徐龙威;雍婕;周海燕-.一种新型糖苷水解酶的异源表达及酶学性质研究)[J].湖南农业大学学报(自然科学版),2022(06):650-658
A类:
MtGH6,pET21a,pBES
B类:
糖苷水解酶,异源表达,酶学性质,质粒,pPICZ,大肠埃希菌,BL21,枯草芽孢杆菌,RIK1285,毕赤酵母,GS115,工程菌,分离纯化,宿主菌,生长状况,产酶,酶活力,OD,微晶纤维素,Mn2+,生物燃料
AB值:
0.166364
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