典型文献
AMPKα1不同功能位点的突变对小鼠卵母细胞成熟能力的影响
文献摘要：
单磷酸腺苷活化蛋白激酶(adenosine 5'-monophosphate-activated protein kinase,AMPK)作为哺乳细胞内调控代谢的关键酶,在卵母细胞成熟过程中发挥重要作用,但目前AMPK的催化亚基AMPKα1在小鼠(Mus musculus)卵母细胞成熟过程中发挥的作用尚不清楚.本研究利用重叠延伸PCR(splicing by overlap extension PCR,SOE-PCR)技术对小鼠AMPKα1基因的多个位点进行了突变,分别获得AMPKα1-D157A、AMPKα1-T172D、AMPKα1-S485A以及AMPKα1-S485A-S173A突变体,在Hela细胞系中验证其功能后体外转录得到cRNAs,并通过显微注射技术在小鼠卵母细胞中超表达含有各突变位点的AMPKα1基因.结果显示,AMPKα1及其突变体在Hela细胞的胞质内广泛分布,且超表达AMPKα1-S485A突变体的细胞增殖数量和活性均增加;同时,AMPKα1及其突变体在小鼠卵母细胞中的超表达呈聚集分布,并与减数分裂过程中的染色质分离相关联.与对照组相比,除超表达AMPKα1-S485A组之外,其余各组的超表达都加速了小鼠卵母细胞的成熟进程,而超表达AMPKα1-S485A突变体的卵母细胞生发泡破裂(germinal vesicle breakdown,GVBD)率与对照组相比无显著差异,且增加了卵母细胞的极体排出率以及降低了卵母细胞的死亡率.以上结果表明,AMPKα1在小鼠卵母细胞成熟过程发挥着重要作用,为其后续在卵母细胞中的作用研究提供了参考.
文献关键词：
单磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK);功能位点突变;显微注射;小鼠卵母细胞成熟
中图分类号：
作者姓名：
石丽君;任雪华;虞莲;王丽丽;雷安民
作者机构：
西北农林科技大学动物医学院/陕西省干细胞工程技术研究中心,杨凌712100
文献出处：
引用格式：
[1]石丽君;任雪华;虞莲;王丽丽;雷安民-.AMPKα1不同功能位点的突变对小鼠卵母细胞成熟能力的影响)[J].农业生物技术学报,2022(03):413-424
A类：
小鼠卵母细胞成熟,D157A,T172D,S485A,S173A,功能位点突变
B类：
AMPK,单磷酸腺苷活化蛋白激酶,adenosine,monophosphate,activated,protein,kinase,哺乳,内调,关键酶,成熟过程,催化亚基,Mus,musculus,研究利用,splicing,by,overlap,extension,SOE,个位,突变体,Hela,细胞系,后体,体外转录,录得,cRNAs,显微注射,注射技术,中超,超表达,突变位点,聚集分布,减数分裂,染色质,相关联,成熟进程,发泡,germinal,vesicle,breakdown,GVBD,极体
AB值：
0.263199
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