目的:探究桥粒斑蛋白(DSP)在肺动脉高压(PH)大鼠模型与人肺动脉平滑肌细胞(hPASMCs)的表达变化及其在PH发生、发展中的作用。方法:24只SPF级别雄性SD大鼠运用随机数字表法随机分为正常对照(NC)组、野百合碱(MCT)组、低氧(HYP)组及低氧联合Sugen5416(SuHx)组，检测各组大鼠右心室收缩压(RVSP)及右心室肥厚指数(RVHI)，观察各组大鼠血管增厚程度；蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠中肺组织中DSP的表达情况。体外培养hPASMCs，分别用转化生长因子β1(TGF-β1)或HYP处理细胞24、48、72 h，Western blot检测各组细胞中DSP表达情况。采用小分子siRNA DSP干扰序列及阴性对照序列分别转染hPASMCs，分为DSP干扰(siDSP)组及阴性对照(siNT)组。2组均进行TGF-β1、CoCl 2或HYP处理48 h，Western blot检测增殖分化及凋亡相关蛋白[p-p38、增殖相关蛋白(PCNA)、抗凋亡蛋白(Bcl2)、促凋亡蛋白(Bax)]的表达情况，划痕实验检测细胞的迁移能力变化，EdU细胞增殖流式检测细胞增殖能力变化。 结果:MCT组、HYP组、SuHx组DSP表达量[(3.10±0.59)、(4.34±0.75)、(3.84±0.13)]较NC组(1.00±0.19)升高，差异均有统计学意义( P值均<0.05)。TGF-β1 24 h组、HYP 72 h组hPASMCs的DSP蛋白表达分别较TGF-β1 0 h组及HYP 0 h组升高[(4.42±0.35)比(1.00±0.07)、(2.62±0.32)比(1.00±0.21)]，差异均有统计学意义( P值均<0.01)。siDSP+TGF-β1组、siDSP+CoCl 2组、siDSP+HYP组中hPASMCs的p-p38表达量较siNT+TGF-β1组、siNT+CoCl 2组、siNT+HYP组升高[(2.14±0.20)比(1.00±0.14)、(1.66±0.09)比(1.00±0.12)、(3.03±0.22)比(1.00±0.50)]，差异均有统计学意义( P值均<0.05)。siDSP+HYP组中hPASMCs的PCNA表达量较siNT+HYP组下降[(0.55±0.04)比(1.00±0.04)]，差异有统计学意义( P值<0.05)。siDSP+TGF-β1组、siDSP+CoCl 2组、siDSP+HYP组中hPASMCs的Bcl2/Bax比值较siNT+TGF-β1组、siNT+CoCl 2组、siNT+HYP组下降[(0.85±0.06)比(1.00±0.04)、(0.73±0.08)比(1.00±0.07)、(0.72±0.01)比(1.00±0.05)]，差异均有统计学意义( P值均<0.05)。siDSP+TGF-β1组hPASMCs的细胞迁移率较siNT+TGF-β1组减少[(27.56±2.44)%比(58.05±2.25)%]，差异有统计学意义( t＝9.20， P<0.001)；siDSP+CoCl 2组hPASMCs的细胞迁移率较siNT CoCl 2组减少[(25.78±2.55)%比(47.30±2.10)%]，差异有统计学意义( t＝6.53， P<0.001)。siDSP+TGF-β1组hPASMCs的细胞增殖率较siNT+TGF-β1组减少[(6.07±0.23)%比(10.62±0.50)%]，差异有统计学意义( t＝8.29， P＝0.001)；siDSP+HYP组hPASMCs的细胞增殖率较siNT+HYP组减少[(2.84±0.46)%比(5.56±0.46)%]，差异有统计学意义( t＝4.17， P＝0.014)。 结论:DSP能够促进hPASMCs的增殖和迁移，促进肺血管的重构，在PH的发生、发展起重要作用。

肺动脉高压;转化生长因子β1;桥粒斑蛋白;肺动脉平滑肌细胞

吴雪芬;江倩;罗晓韵;王健;卢文菊;张晨婷

广州医科大学附属第一医院呼吸与危重症医学科　广州呼吸健康研究院　国家呼吸系统疾病临床医学研究中心　国家呼吸医学中心　呼吸疾病国家重点实验室，广州　510120

国际呼吸杂志

[1]吴雪芬;江倩;罗晓韵;王健;卢文菊;张晨婷-.桥粒斑蛋白在肺动脉高压中对血管肺动脉平滑肌的功能研究)[J].国际呼吸杂志,2022(23):1809-1817

hPASMCs,Sugen5416,SuHx,siDSP,siNT,CoCl ,siDSP+TGF,siDSP+CoCl ,siDSP+HYP,siNT+TGF,siNT+CoCl ,siNT+HYP

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