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基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术无需抗体富集直接检测血清M蛋白方法的建立
文献摘要:
目的:基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术(MALDI-TOF MS)技术建立一种无需抗体富集直接检测血清M蛋白的方法,并评估其检测效能。方法:方法学建立。收集在首都医科大学附属北京朝阳医院申请M蛋白鉴定检测的患者检验后剩余血清标本712份。用TCEP还原剂处理IgG、IgA纯品获得免疫球蛋白轻链,初步确定检测方法。收集20名健康体检人群检验后剩余血清标本,确定κ和λ轻链离子峰质荷比范围。设置8个平行管和8个批次进行批内和批间重复性评价;选取23例M蛋白阳性标本进行10倍、100倍和200倍稀释,采用所建MALDI-TOF MS方法检测M蛋白,评价灵敏度;采用IFE、SPE和MALDI-TOF MS 3种方法同时检测M蛋白,计算MALDI-TOF MS方法与IFE和SPE的符合率。结果:批内和批间重复性均为100%;对23份M蛋白阳性标本的原倍、10倍、100倍和200倍稀释标本进行测定,MALDI-TOF MS对M蛋白的检测限为0.06~0.18 g/L;在712份标本中,以IFE为金标准,SPE与MALDI-TOF MS总的符合率分别为85.9%和92.3%,SPE与MALDI-TOF MS的阳性符合率分别为72.8%和99.7%;在M蛋白的不同型别中,MALDI-TOF-MS在IgA、IgD、IgM、游离轻链型和双克隆组中对M蛋白的检出率为100%,而SPE对IgM、IgA和游离轻链型标本的检出率分别只有66.7%、58%和19.5%;IgG组有1份阳性标本MALDI-TOF MS未检出。对23份M蛋白阳性标本进行原倍、10倍、100倍和200倍稀释后,10倍稀释时MALDI-TOF MS的检出率为100%,IFE为96%;100倍和200倍稀释时,IFE的检出率分别为MALDI-TOF MS的28%和23%。结论:本研究成功建立了血清M蛋白的MALDI-TOF MS检测方法,该法检测通量高、速度快,具有良好的灵敏度、特异性和符合率。
文献关键词:
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱;M蛋白;多发性骨髓瘤;血清蛋白电泳;免疫固定电泳
中图分类号:
作者姓名:
崔瑞芳;张顺利;孙德慧;王默;翟玉华;岳育红;周晓光;王清涛;张瑞
作者机构:
长治医学院附属和平医院检验科,长治 046000;首都医科大学附属北京朝阳医院检验科,北京100020;融智生物科技(青岛)有限公司,青岛 266109
文献出处:
引用格式:
[1]崔瑞芳;张顺利;孙德慧;王默;翟玉华;岳育红;周晓光;王清涛;张瑞-.基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术无需抗体富集直接检测血清M蛋白方法的建立)[J].中华检验医学杂志,2022(10):1087-1092
A类:
B类:
于基质,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术,直接检测,白方,MALDI,TOF,方法学,首都医科大学,北京朝阳医院,蛋白鉴定,鉴定检测,血清标本,TCEP,还原剂,IgG,IgA,得免,免疫球蛋白轻链,健康体检人群,质荷比,白阳,阳性标本,IFE,SPE,同时检测,符合率,检测限,金标准,型别,IgD,IgM,游离轻链,轻链型,双克隆,未检,多发性骨髓瘤,血清蛋白电泳,免疫固定电泳
AB值:
0.221193
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