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Linc-ROR靶向miR-181a-5p调控卵巢上皮性癌细胞恶性生物学行为的研究
文献摘要:
目的:探讨长链基因间非编码RNA-重编程调节因子(Linc-ROR)及微小RNA 181a-5p(miR-181a-5p)在卵巢高级别浆液性癌(HGSOC)组织中的表达,并探讨两者对卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞恶性生物学行为的影响及作用机制。方法:(1)收集2019年6月—2021年6月在青岛大学附属医院行手术治疗的36例HGSOC患者,以同期因子宫肌瘤行子宫全切除+双侧附件切除术(输卵管和卵巢正常)的26例患者作为对照。实时荧光定量PCR技术检测HGSOC组织、正常输卵管伞端及正常卵巢组织中Linc-ROR和miR-181a-5p的表达,分析两者的相关性及与HGSOC患者手术病理分期和淋巴结转移的关系。(2)应用生物信息学软件预测Linc-ROR与miR-181a-5p的靶向关系,并采用双荧光素酶实验验证。采用小分子干扰RNA(siRNA)技术分别沉默和过度表达卵巢癌细胞系SKOV3细胞中Linc-ROR的表达,实验分为4组,Linc-ROR-NC组(即阴性对照)、Linc-ROR-p组(即过度表达Linc-ROR)、Linc-ROR-si组(即沉默Linc-ROR表达)、Linc-RORsi+miR-181a-5p-si组(即同时沉默Linc-ROR和miR-181a-5p表达)。实时荧光定量PCR技术检测转染后4组SKOV3细胞中Linc-ROR和miR-181a-5p的表达,细胞克隆形成实验、划痕实验及穿膜(transwell)小室实验分别检测转染后4组SKOV3细胞的增殖、迁移和侵袭能力。蛋白印迹(western blot)法检测转染后4组SKOV3细胞中Wnt通路相关蛋白β-连环蛋白(β-catenin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)的表达。结果:(1)HGSOC组织中Linc-ROR的表达水平为3.77±0.13,显著高于正常卵巢组织和正常输卵管伞端组织(分别为1.00±0.21、1.08±0.26;
P均<0.01);HGSOC组织中miR-181a-5p的表达水平为0.38±0.12,显著低于正常卵巢组织和正常输卵管伞端组织(分别为1.03±0.21、1.01±0.20;
P均<0.01)。HGSOC组织中Linc-ROR与miR-181a-5p表达呈显著负相关(
r=-0.979,
P<0.01);Linc-ROR、miR-181a-5p的表达水平与HGSOC患者的手术病理分期、淋巴结转移均明显有关(
P均<0.05)。(2)生物信息学软件预测并经双荧光素酶实验证实,Linc-ROR与miR-181a-5p存在靶向结合位点。与Linc-ROR-NC组比较,Linc-ROR-p组SKOV3细胞中miR-181a-5p及E-cadherin蛋白的表达水平下降,Linc-ROR及β-catenin和vimentin蛋白的表达水平升高,细胞克隆数增加,肿瘤细胞侵袭和迁移能力增强,分别比较,差异均有统计学意义(
P均<0.01);Linc-ROR-si组SKOV3细胞中miR-181a-5p及E-cadherin蛋白的表达水平升高,Linc-ROR及β-catenin和vimentin蛋白的表达水平下降,细胞克隆数减少,细胞迁移和侵袭能力下降,分别比较,差异均有统计学意义(
P均<0.01);而Linc-ROR-si+miR-181a-5p-si组SKOV3细胞中miR-181a-5p及E-cadherin、β-catenin、vimentin蛋白的表达水平均无明显变化,肿瘤细胞的增殖、侵袭和迁移能力也均无明显变化,分别比较,差异均无统计学意义(
P均>0.05)。
结论:HGSOC组织中Linc-ROR高表达、miR-181a-5p低表达。Linc-ROR通过抑制miR-181a-5p表达激活Wnt信号通路,从而调控卵巢癌细胞的恶性生物学行为,促进肿瘤的侵袭和转移。
文献关键词:
中图分类号:
作者姓名:
蒋玲;夏玉芳;于啸;孙欣;文小玲;娄艳辉
作者机构:
青岛大学附属医院妇科,青岛 266100
文献出处:
引用格式:
[1]蒋玲;夏玉芳;于啸;孙欣;文小玲;娄艳辉-.Linc-ROR靶向miR-181a-5p调控卵巢上皮性癌细胞恶性生物学行为的研究)[J].中华妇产科杂志,2022(04):301-306
A类:
RORsi+miR,si+miR
B类:
Linc,181a,5p,卵巢上皮性癌,癌细胞恶性生物学行为,长链,非编码,重编程,调节因子,卵巢高级别浆液性癌,HGSOC,影响及作用,青岛大学,大学附属医院,子宫肌瘤,全切,双侧附件切除术,输卵管,伞端,卵巢组织,手术病理,病理分期,淋巴结转移,生物信息学软件,软件预测,双荧光素酶,小分子干扰,siRNA,过度表达,卵巢癌细胞,细胞系,SKOV3,NC,转染,细胞克隆形成,划痕实验,transwell,小室,细胞的增殖,侵袭能力,蛋白印迹,western,blot,Wnt,连环蛋白,catenin,钙黏蛋白,cadherin,波形蛋白,vimentin,端组,低于正常,结合位点,肿瘤细胞,细胞侵袭和迁移,迁移能力,细胞迁移和侵袭,低表达,侵袭和转移
AB值:
0.160726
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