典型文献
葡萄白粉病菌环介导等温扩增检测体系的建立与应用
文献摘要：
为了建立高效准确的葡萄白粉病菌(Uncinulanecator)环介导等温扩增(LAMP)检测体系,为葡萄白粉病的早期诊断和监测预警提供依据,根据葡萄白粉病菌细胞色素P450全长基因序列设计合成3组LAMP引物并进行筛选,对包括葡萄白粉病菌在内的11种植物病原真菌的DNA进行LAMP扩增,检测体系的特异性,建立并优化葡萄白粉病菌LAMP反应体系,评价体系的灵敏性.使用优化后的检测体系扩增田间发病叶片的总DNA,检测所建立体系的实用性.LAMP最佳反应条件是:以UNITF3-1/UNITB3-1为外引物,以UNITFIP-1/UNITBIP-1为内引物,62℃反应60 min,Bst DNA聚合酶浓度为0.320 U/μL,甜菜碱浓度为0.8 mol/L,dNTPs浓度为2.6 mmol/L,Mg2+浓度为4.8 mmol/L,内外引物配比为6:1,能够检测出葡萄白粉病菌DNA,灵敏度为1 pg/μL.应用已建立的检测体系对田间采集的病叶样品进行检测,能够检测到葡萄白粉病菌,准确率达100％.综上,建立的葡萄白粉病菌LAMP检测体系特异性强、灵敏度高,可用于田间葡萄白粉病菌的检测.
文献关键词：
葡萄白粉病菌;LAMP;引物筛选;反应条件优化;田间检测
中图分类号：
作者姓名：
王雯雯;刘心缘;马云妮;顾沛雯
作者机构：
宁夏大学农学院,银川750021
文献出处：
引用格式：
[1]王雯雯;刘心缘;马云妮;顾沛雯-.葡萄白粉病菌环介导等温扩增检测体系的建立与应用)[J].中国果树,2022(10):22-29,前插1
A类：
葡萄白粉病菌,Uncinulanecator,UNITF3,UNITB3,UNITFIP,UNITBIP
B类：
环介导等温扩增,检测体系,建立与应用,LAMP,监测预警,细胞色素,P450,全长,基因序列,序列设计,设计合成,植物病原真菌,反应体系,灵敏性,使用优化,建立体系,Bst,甜菜碱,碱浓度,dNTPs,Mg2+,pg,灵敏度高,于田,引物筛选,反应条件优化,田间检测
AB值：
0.164674
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