目的 探讨屎肠球菌QH06对溃疡性结肠炎(UC)大鼠肠道菌群与肠道免疫的影响及其机制.方法 36只SPF级雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、UC模型组和屎肠球菌组(12只/组).除正常对照组外,其余2组以5％TNBS/乙醇灌肠法建立UC模型.造模成功后屎肠球菌组用屎肠球菌QH06灌胃干预,剂量为0.21 g/kg,正常对照组和UC组用等体积的蒸馏水灌胃干预.干预14 d后用HE染色法观察各组大鼠结肠病理改变并评分,用RT-qPCR和ELISA法检测细胞因子IL-4、IL-10、IL-12和IFN-γ的mRNA和蛋白表达水平,用免疫组化和ELISA法检测TLR2蛋白表达量.利用Illumina Miseq平台对各组大鼠肠道菌群测序同时进行生物信息学分析.最后肠道菌群和TLR2蛋白表达量、细胞因子等指标进行相关性分析.结果 与正常对照组相比,UC组大鼠体质量下降(P<0.01),结肠组织损伤严重,病理学评分显著升高(P<0.01);ELISA和RT-qPCR结果显示,IFN-γ(P<0.01),IL-12(P<0.01),TLR2(P<0.01)的蛋白表达水平和IFN-γ(P<0.05),IL-12(P<0.05),IL-10(P<0.05)的mRNA表达水平上调.Illumina Miseq测序和分析显示,UC组大鼠肠道菌群多样性Shannon指数(P<0.05)、Ace指数(P<0.01)和Chao指数(P<0.05)降低.Enterobacteriaceae(P<0.01)增多,Burkholderiaceae(P<0.05)减少.与UC组相比,屎肠球菌组大鼠体质量增加(P<0.05),损伤减轻,病理学评分下降(P<0.05),结肠组织中IFN-γ(P<0.01),IL-12(P<0.05)、TLR2蛋白表达量(P<0.01)下调,IL-4蛋白表达量上调(P<0.05),IFN-γ(P<0.05)、IL-12(P<0.05)的mRNA表达量下调,肠道菌群多样性Shannon指数(P<0.05)、Ace指数(P<0.05)和Chao指数(P<0.05)升高.Enterobacteriaceae(P<0.05)减少,Burkholderiaceae(P<0.05)和Rikenellaceae(P<0.01)增多;肠道菌群、细胞因子含量和TLR2蛋白表达量相关性分析结果显示,IFN-γ与Enterobacteriaceae呈正相关、而与Prevotellaceae,Desulfovibrionaceae、norank_o__Mollicutes_RF39,Clostridiales_vadinBB60_group呈负相关;TLR2表达水平与Clostridiales_vadinBB60_group,norank_o__Mollicutes_RF39和Prevotellaceae呈负相关.结论 屎肠球菌QH06能减轻TNBS诱导的UC大鼠的结肠黏膜损伤,其机制可能与普氏菌科等短链脂肪酸产生菌丰度的升高,TLR2介导的异常免疫反应的抑制有关.

屎肠球菌;溃疡性结肠炎;肠道菌群;TLR2;细胞因子

库尔班乃木·卡合曼;赵健锋;穆凯代斯·艾合买提;王汉铭;朱稷蔚;潘文涛;卡思木江·阿西木江

新疆医科大学第一附属医院康复医学科,新疆 乌鲁木齐 830011;新疆医科大学第五临床医学院,新疆 乌鲁木齐 830011;新疆医科大学第二临床医学院,新疆 乌鲁木齐 830011;新疆医科大学基础医学院物生化学与分子生物学教研室,新疆 乌鲁木齐 830017

南方医科大学学报

[1]库尔班乃木·卡合曼;赵健锋;穆凯代斯·艾合买提;王汉铭;朱稷蔚;潘文涛;卡思木江·阿西木江-.屎肠球菌QH06能减轻溃疡性结肠炎大鼠的结肠黏膜损伤)[J].南方医科大学学报,2022(07):976-987

QH06,RF39

屎肠球菌,溃疡性结肠炎大鼠,结肠黏膜损伤,UC,肠道免疫,SPF,Wistar,正常对照,TNBS,灌肠,灌胃,蒸馏水,水灌,HE,染色法,结肠病理,病理改变,qPCR,IFN,蛋白表达水平,免疫组化,TLR2,Illumina,Miseq,生物信息学分析,后肠,体质量下降,结肠组织,组织损伤,肠道菌群多样性,Shannon,Ace,Chao,Enterobacteriaceae,Burkholderiaceae,体质量增加,Rikenellaceae,Prevotellaceae,Desulfovibrionaceae,norank,Mollicutes,Clostridiales,vadinBB60,group,普氏,短链脂肪酸,生菌,免疫反应

0.221219