目的 分离家蝇幼虫肠道可培养细菌,并研究其产消化酶活性,探讨肠道细菌对家蝇幼虫消化食物以及生长发育的影响.方法 采用传统细菌分离培养法分离纯化家蝇幼虫肠道细菌,采用16S rRNA序列分析进行分子鉴定;通过筛选培养基筛选产蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶的细菌,测量水解圈与菌落直径的比值(D/d值),比较不同细菌的产消化酶活性.数据用SPSS 20.0软件进行统计学分析,组间比较采用单因素方差分析.结果 在家蝇幼虫肠道中,通过厌氧培养分离到6属9种兼性厌氧细菌,其中普罗威登斯菌属3种(普罗维登斯菌DSM 19967、雷氏普罗维登斯菌株、斯氏普罗威登斯菌),肠球菌属2种(铅黄肠球菌、粪肠球菌);假柠檬酸杆菌属(粪假柠檬酸杆菌)、摩根菌属(摩根摩根菌)、肠杆菌属(霍氏肠杆菌)、克雷伯氏菌属(肺炎克雷伯菌)各1种.通过需氧培养分离到8属10种细菌,其中肠杆菌属2种(霍氏肠杆菌、阴沟肠杆菌),普罗威登斯菌属2种(斯氏普罗威登斯菌、居幼虫普罗威登斯菌);克雷伯氏菌属(肺炎克雷伯菌)、假单胞菌属(铜绿假单胞菌)、不动杆菌属(别雷斯不动杆菌)、乳球菌属(乳酸乳球菌)、梭形杆菌属(纺锤形赖氨酸芽孢杆菌)和芽孢杆菌属(沙福芽孢杆菌)各1种.经厌氧培养分离到的兼性厌氧细菌,在厌氧培养条件下,产淀粉酶活性的细菌有9种,产纤维素酶活性的细菌有8种,产脂肪酶活性的细菌有1种,未筛选到产蛋白酶活性的细菌;在需氧培养条件下,产淀粉酶活性的细菌有9种,产纤维素酶活性的细菌有8种,未筛选到产蛋白酶活性和脂肪酶活性的细菌.厌氧培养条件下,9种兼性厌氧细菌的产淀粉酶活性无差异(F=1.953,P＞0.05);8种兼性厌氧菌的产纤维酶活性中,铅黄肠球菌的产酶活性最强,D/d值为1.36±0.06(F=3.367,P＜0.05);仅雷氏普罗维登斯菌具有产脂肪酶活性,D/d值为2.28±0.16.需氧状态下,9种兼性厌氧菌的产淀粉酶活性中,粪肠球菌的产淀粉酶活性最强,D/d值为1.42±0.06(F=3.881,P＜0.05);8种兼性厌氧菌的产纤维酶活性中,铅黄肠球菌的产纤维酶活性最强,D/d值为1.29±0.01(F=6.633,P＜0.05).经需氧培养分离到的需氧可培养细菌中,铜绿假单胞菌和沙福芽孢杆菌有产蛋白酶活性,D/d值分别为3.67±0.25、3.58±0.31,差异无统计学意义(F=0.087,P＞0.05);仅筛选到肺炎克雷伯菌有产淀粉酶活性,D/d值为4.83±0.12;未筛选到产纤维素酶和脂肪酶活性的细菌.结论 家蝇幼虫肠道细菌中可培养细菌组成相对单一,但多数厌氧细菌和需氧细菌有分泌消化酶的功能.

家蝇幼虫;肠道厌氧细菌;肠道需氧细菌;产消化酶活性

张可心;刘文娟;张心雨;张倩;张瑞玲;张忠

山东第一医科大学基础医学院,泰安271016;山东第一医科大学生命科学学院,泰安271016

中国寄生虫学与寄生虫病杂志

[1]张可心;刘文娟;张心雨;张倩;张瑞玲;张忠-.实验室品系家蝇幼虫肠道可培养细菌的分离、鉴定与产消化酶活性分析)[J].中国寄生虫学与寄生虫病杂志,2022(03):355-361,368

家蝇幼虫,产消化酶活性,传统细菌分离培养法,普罗维登斯,斯氏普罗威登斯菌,肠道厌氧细菌,肠道需氧细菌

实验室品系,肠道可培养细菌,活性分析,离家,肠道细菌,化食,分离纯化,16S,rRNA,序列分析,分子鉴定,过筛,筛选培养基,培养基筛选,产蛋,菌落直径,统计学分析,单因素方差分析,普罗威登斯菌属,DSM,肠球菌属,铅黄肠球菌,粪肠球菌,柠檬酸杆菌,摩根摩根菌,肠杆菌属,霍氏肠杆菌,克雷伯氏菌属,肺炎克雷伯菌,中肠,阴沟肠杆菌,假单胞菌属,铜绿假单胞菌,不动杆菌属,别雷,乳酸乳球菌,纺锤形赖氨酸芽孢杆菌,芽孢杆菌属,沙福芽孢杆菌,培养条件,淀粉酶活性,纤维素酶活性,产脂,脂肪酶活性,蛋白酶活性,兼性厌氧菌,纤维酶活性,产酶活性,细菌组成

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